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在目前已有的各种合成三氣蔗糖的方法中，棉籽糖水解法受到人们的关注。 虽然从技术和经济方面考虑，这种方法目前离实用阶段尚有一定的距离，却为三 氣庶糖的合成提出了一种新的思路和方法，具有较高的理论研究价值和应用前 贵。棉籽糖水解法中的氣化衍生过程与化学方法一致，这姐仅对其中的酶法水解 部分做详细的研究和探讨。
单链莫奈林在高温和酸性溶液中能保持稳定。细胞抽提物经高温或酸性溶液 处理后，莫奈林仍在溶液中，而大多数宿主蛋白已发生沉淀。细胞抽提物酸性溶 液PH5.0、4.5或4.0保持12h，或501保持丨Omin，即可提取到可溶组分中的 莫奈林（图5-20)。单链奠奈林在70T或在PH3. 5时与其他蛋白一起沉淀。经
莫奈林的相对分子质量测定值为10700 ~ 11500，计算值为11069 (莫奈林 IV),等电点p/为9.0?9. 3。其甜度通常认为是蔗糖的2000 ~ 2500倍，也有人 报道为3000倍。甜味特性与嗦吗甜相似，甜刺激来得慢，去得也慢，甜味觉持 续时间较长，味觉延绵；莫奈林的紫外吸收光谱与其他含芳香氨基酸的很多蛋白 质相似，在中性及酸性环境中的最大吸收在波长277nm处。在强碱性环境中由 于酪氨酸的离子化，最大吸收移至波长290mii处。荧光发射光谱的最高峰出现 在波长337mn处，还有一个并肩峰位于波长300mri处。
产物经氢氡化钠碱化，水蒸气除去溶剂和环己胺，结晶和重结晶得产品。此 法能避免环己胺和氨基磺酸的中间反应，反应物黏度不会增加，易于混合，反应 能充分进行。
甲醇溶液中和至pH =7?8，抽滤，少量甲醇洗涤滤饼，得白色粉末状固体，即
4f-氣-4f-脱氧-1, 4, 6-气氣-1, 4, 6-三 4*-氣-4*-脱氧-1,4.6-三氯-1,脫氧-a-D-吡喃半乳糖苷- 4, 6-=脫极-a-D-吡喃卞乳糖
另有人把蕺菌血红蛋白基因(vgb)基因在毕赤酵母中的功能应用于高甜度 莫奈林所组酵母，解决毕赤酵母高密度发酵中存在的供氧不足的问题，进一步提 高髙甜度莫奈林的产萤。他们将获得的由高甜度莫奈林和vgb两个基因同时整合 的重组酵母GSU5/pPIC9M/pPlC3.5kV,以甲醇诱导，高甜度英奈林基因和vgb 基W分别以分泌和胞内的形式得到表达，且表达产物均有生物活性。VHb在胞 内的成功表达，使重组毕赤酵母高甜度莫奈林的分泌表达量提高了 20%，达
4-?人5溶于丨00111丨.甲基异丁基酮，加热至50弋，再加人3mL叔丁胺，反应 4~6h,浓缩后加庚烷冷却结晶，过滤、干燥得到白色晶体c图3 -20所示 为4 - PAS在叔丁胺催化下得率与反应时间的关系，可见此条件下反应5. 5h
五、蔗糖衍生物的'甜味机理
一、三氣蔗糖的物化性质
