南溪区结晶果糖
图3-40蔗糖分子的生甜团C-4 (X)、C-2 (B)和C-3f (AH)
(四)辅助因素对产率的影响研究表明,在低熔点混合物中加入适宙:的有机溶剂能降低混合物的熔点,从 而提商酶反应的效率。图2-66所示为加入不同溶剂对反应产率的影响。其中, 加入二甲基亚砜(DMSO)和2-甲氧基乙酸乙酯(MEA>能使产率达到60%, 而辛醉和正己烷的加人使产率低于50%。这可能是因为疏水性的有机溶剂能够 改进和保持低熔点混合物的特性,从而能够促进酶反应的产率。图2 -66 不同辅助有机溶剂对反应产率的影响 注:有机溶剂都按丨5% (w/w)的比例加人,苄氧羰基-L-天冬氨酸二乙《和D-内氨酰胺分 别加人0.5mmOl, -胰凝乳蛋f*丨酶浓度为丨5% (w/w)和丨2% (w/w)的水,37?€下反庖丨Oh。表2-37同时加入DIV1SO和MEA作为低熔点混合物的辅助因子对反应产率的影响
(8)对大鼠和狗的研究表明它对胰賍和血液中葡萄糖含量也没有不良 影响。
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③蔗糖C - 3位的构型对甜味也很重要,因为C - 3位的差向立体异构体 (即异蔗糖)没有甜味。
为进一步说明取代基大小及其电负性对甜味分子甜度的影响,对卤素混合取 代的蔗糖衍生物甜度进行研究。4-紙-r,4',6'-三溴蔗糖衍生物的甜度是蔗 糖的1000倍,而4,广,4',6,-四氣蔗糖衍生物比蔗糖甜2200倍。这表 明C-4取代基的大小对甜度影响较大,C-4上取代基由氣原子变为氟原子,随 着原子大小的减小,甜度减少50%。表3-20所示为各种蔗糖卤代衍生物的相 对甜度。表 3-20蔗糖卤代衍生物的相对甜度
融合蛋白提取过程中应加人一定量的钙离子,这样能稳定和活化核酸酶。当 不加钙离子时,融合蛋白提取得率很低,这表明核酸酶活力增强会增加融合蛋白 在内含体的溶解庞。
(-)甜味受体的发现
由于Bntzzdn独特的科研和产业应用价值,大蛩生产高纯度的Brazzein成为 产业界的目标。Brazzein在天然植物中含量甚微,提取困难,产最受到限制。因 此利用基因工程,在其他宿主中表达该外源基因是快速冇效的途径。美国Nektar Worldwide公司已将Brazzein表达至玉米中,It转基因玉米中能提取1kg Brazzein。 另也曾尝试在酵母中表达合成Brazzein,但没有成功。这里讨论用大肠杆菌表达 Brazzein 基因。