乌兰县海藻糖
将甜菊苷、可溶淀粉和浸麻芽孢杆菌MaciUus maccrans)的环糊精葡栅基 转移酶前后分别在40弋、281乙酸盐缓冲液中保持8h和10h,然后分离得到多 种转葡糖基组分（结构见图4-5),经分析知：主要转匍糖基产物中1 -la和 1 -lb是单葡糖基转化产物，1 -2a、1 -2b和1 -2c是双葡糖基转化产物， 1 -3a, l-3b、1-3c和1 -3d是三葡糖基转化产物，四葡糖基转化物的得率非 常低。
三氯蔗糖是以蔗糖为原料经氣化作用制得，图3-1所示为其化学结构式。 X-衍射分析表明它是一种带有空间的正交晶体，每个晶体单元包含4个三氣蔗 糖分+，在0H-2和0-3'之间有一分子内氢键，这氢键能阻止两环之间糖苷 键的旋转。核磁共振分析表明，它在二甲基亚砜中的氢键主要是位于OH-3'和
3.5-5.5, a = 10，Z - Asp 和 PheOMe 分別为 80mmol/L、240mmol/L 时，Ym^ 接近100%，该结果在实验允许误差范围内与理论值吻合
(一）反应原理和步骤
美国于1958年通过了对1938年食品、医药品和化妆品中食品添加剂的修正 案，仍把甜密素看作是公认的安全物质，这种悄况一直持续到1%9年。20世纪 50?60年代期间，甜蜜素得到迅速发展。它的甜度是蔗糖的30 ~50倍，与糖楮 共用时能掩盖掉糖精的不良特性，混合物的甜味质量还可以。丨970年以前，美 国每年的消耗量竟髙达90001。
Lethco等人采用中性条件下经柱色谱纯化的[3-mC]糖楮试验发现其有代 谢现象，但他们采用的去除杂质苯并[d]异噻唑啉-1, 1-二氧化物（BIT) 或3-羟基BIT的方法，人们无法加以评价。
显然，具有显著a-半乳糖苷酶活力的酶制剂都是从霉菌菌丝体中获得的。 在5个具有最强的水解TCR活力的筠菌中，有4个是从W.wVwcefl中获得的，有 1个是从C. muscae中获得的。其中Af. vitmcea ATCC 20034在所有被测试的微生 物中，对TCR具有最高的水解能力。从该微生物中提取的a-半乳糖苷酶（EC 3.2.1.22)不含转化酶的活力，目前已在甜菜糖精炼中被用来水解棉籽糖。它还 可以被固定化，此时对TCR则有更强的水解能力。
从图4-7可以看出，虽然加酶量不同，但反应一段时间后，转化反应趋向 平缓。增大酶量可加速达到转化平衡，但不能改变这种平衡；对各底物转化速率 比较发现，甜菊苷（S)的转化速率较快，其他糖苷转化速率较慢，只有在S基 本转化完成时才发生显著转化。因此当酶谊较少（<800U/g甜菊苷）时，在所 用反应时间内，转化未达到平衡，S的转化起主导作用。从转化底物来源看，当 加酶量较少时，主要为甜菊苷（S)进行转化，其他组分的转化萤较少。当酶届： 增加时，S的转化量增加较少，而其他组分的转化较显著。减少一半加酶虽同时 延长一倍反应时间的转化结果不如短时间但高加酶虽的结果，这可能是由于糖转 化过程中存在抑制作用。
A、B两种分子的结构总特征很相似。新橙皮苷二氢查耳酮分子整体呈“J” 字母形状，办-新橙皮糖基位于“r字母的弯曲部位，橙皮素二氢查耳酮的糖 苷配基位于“厂字母的直线部位。一些早期的研究认为二氢查耳酮的“活性” 构象（如带有甜味的）是：糖苷配基呈弯曲或扭曲状，两个芳族环的平面大约 呈90°。假如上述固体状态的构象分析结果可引申至液体状态下的分子构象，那 就说明这些早期的分析结果不对。
与【41蛋白有髙度同源性的109个氨基酸的多肽基W的阅读框架在与 RIM-C基因探针杂交的IX:域中。阅读框架中的起始密码子后即可能是367bP内 含子，据报道这是W1蛋白基因的一个特征。该内含子5,端和3,端的接合序列 分别为GTATGT和TAG，内部保守序列TACTAACA位于内含子3’端上游的31个 核苷酸。大多数核糖体蛋白质基因的上游区域布两个保守序列：H0- M0L1和RPG盒，RPG盒序列为ACACCCATACA (C/T) (A/T)。分离所得基因 在V上游有两个序列与RPG盒相近，序列一为ACACCCACCCACG (13个核苷酸 中10个相同），位于-197 ~ -179;序列二为ACACGCATACAAA (13个核苷酸 中丨1个相同），在非编码链上的-151 ~ -139。
