楚雄州麦芽糖

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表S-20 仙茅蛋白的氨基酸序列‘
(一)利用半乳糖苷酶改性甜叶悬钩子苷
融合蛋白提取过程中应加人一定量的钙离子,这样能稳定和活化核酸酶。当 不加钙离子时,融合蛋白提取得率很低,这表明核酸酶活力增强会增加融合蛋白 在内含体的溶解庞。
通过研究不同预培养时间下,CYH抗性细胞和活细胞的增加量来确定最优 预培养时间。随着培养时间增加,活细胞和CYH抗性细胞增加,但CYH抗性细 胞的增加速率比活细胞快,转化体和活细胞数之比在6h内一直增加,但更长的 培养时间对转化体与活细胞数的比例影响不明显(图5-17),这表明6h内CYH 抗性基因已完全表达了。
用细菌和哺乳动物进行的体内和体外试验表明,阿力甜在基因或染色体水平 上没有毒性(genotoxichy)。在药学领域所进行的-?系列研究表明阿力甜对机体 肠H、贤、中央神经系统功能及自主评价行为(assess mitonomic)没有任何影 响,对空腹血糖水平及口服葡萄糖的分布没有影响。
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因,因此细胞中需有多个该标 记基因(3 ~ 10拷贝/细胞)以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目,通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别,但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%,pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%,PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计,经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
注:①glc =仗葡筠糖基,rha =吐味鼠李糖基c②Rubu?o?idc = ■W■叶患构子芬③甜jec苷即卫茅B苷。图4-丨甜菊醉苷体的化学结构

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