三明市纽甜

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图6 - 18 ZOt时甜蜜岽水溶液的相对密度与浓度的关系曲线
(1)嗜热菌蛋白酶(Thmnolysin)丨sowa等人发现一种金属蛋白酶——嗜 热菌蛋1^1酶(EC3. 4.24.4),可以催化侧链羧酸不带保护基团的Z - Asp和 PheOMe,合成阿斯巴甜前体A'’ -苄氧羰基-L -天冬氨酰-L -苯丙氨酸甲酯 (Z-ASp-PheOMe),见式(2-18〉。在所有关于酶法合成阿斯巴甜前体的报道 中,均采用嗜热菌蛋白酶催化。
已知TCK只有在亲水的溶剂中才能高度溶解,但在保证酶解反应能得到 必要的水的前提下,a-半乳糖苷酶却被证明在与水不互溶的有机溶剂中, 最稳定并具有最高的活力。这个矛盾,可以通过使用被含水缓冲液预饱和的 有机溶液时得以解决。研究发现,高水混溶的溶剂如二氣六环、丙酮、甲醇 和四氢呋喃等,即使使用高达30%的含水缓冲液进行预饱和,也不支持 a-半乳糖苷酶的水解反应。但在含水缓冲液预饱和的正丁醉、甲基异丁基 酮和乙酸乙酯三种溶液中,TCR的溶解度均达到50%以上。这些溶剂同时 也支持a-半乳糖苷酶的活力,只是三者对三氣蔗糖的溶解性存在很大的差 別,如表3-9所示。
(-)莫奈林在大肠杆菌中的表达
糖其余游离羟基活性被钝化,而最活泼的c-6羟基此时尚有反应活性。此时, 利用乙酸酐对C-6进行酯化,从而实现了单基团保护。但因为化学反应没有专 一性,故反应产物仍很复杂,只能得到以C-6单酯化为主(50%左右)的混合 物,故此时需要高效的色谱分离手段加以精制处理。
Aa = S-吡喃?个:糖《
三、阿力甜的化学合成技术阿力甜的化学合成可以分为三步,首先是2, 2, 4,4-四甲基-3-硫化三 亚甲基氨的合成。在冰水浴条件下,将二氣化硫缓慢加人到二异丙基甲酮中,反 应温度不超过30弋。当反应生成的HC1开始减少时,再反应30min后终止反应, HC1用真空泵抽出。这一步亚氧基硫氣的产率能达到90%以上。将得到亚氧基 硫氣溶解在四氢呋喃中与叔丁基钾四氢呋喃溶液混合,搅袢反应lh,反应结束 后,用丨mol/L的盐酸调pH至3.0,加水,同时用乙醚提取反应产物,过滤、干 燥后得到2,2, 4,4-四甲基-3-硫杂环丁酮,产率也能达到90%以上。在密 闭反应釜中让2, 2,4, 4-四中基-3-硫杂环丁酮、盐(最好是磷酸盐等弱酸 盐)及氨衍生物在100T以上的温度下进行反应,2,2,4,4-四甲基-3-硫 杂环丁酮和氨衍生物的缩合物,产率可达到90%以上。为避免高温、高酸性条 件下的副反应,此反应所用的盐,其pKa最好在1?4。第二步,反应产物2,2,
C-6羟基化学保护法的理论基础在于在超低温条件下(-60 ~ -40^),蔗
阁2 - 79 阿斯巴甜与Suosan的结合体

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