来凤县海藻糖

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来凤县海藻糖

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图3-40蔗糖分子的生甜团C-4 (X)、C-2 (B)和C-3f (AH)
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响,更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基(LB)中培养一段时间后,加人IPTG后培养2~3h,大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大,多数在内含体沉积,在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后,大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后, 50%?70%融合蛋白发生解离,这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强,p/约5.4,而核酸酶碱性较强,p/9.4,因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同,甜度是植物提 取Brazzein的2倍,与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味,未折垒(unfolded)或折奋错误
表s -2 甜蛋白嗦吗甜丨和嗦吗甜n的氨基酸组成与顺序
Z - Asp = 80mmoI/L, PheOMe =240mmol/L, a = 10;⑦*线1 ~5表示相应的L的理论结果;⑧"O-.表示在水相7.-八叩=1>?、€0關《; = 8011?1101/丨.,a = l的实聆结采,与之相对应的《论值用曲 残6表示。
1963年,R. S. Shallenberger提出甜味的AH、B系统理论。1972年Kier在 AH、B体系中又引进亲脂的第三结合点,即X疏水部位,并提出著名的AH、 B、X甜味三角理论,使AH、B系统理论得到了重大完善。甜味三角理论的形 成,很大程度上弥补了 AH、B双氢键假说的不足,特別是对强力甜味剂的解释 更具有说服力。因此,尽管这种理论也遭到一些人的怀疑,AH、B、X甜味三角 理论仍然是目前为止人类所能找到的最有效的甜味学说。
关于阿斯巴甜中的天冬氨酸,上述领域的研究表明,经口摄取大剂摄的阿斯 巴甜溶液(34mg/kg),在禁食状态下的血浆天冬衩酸的浓度却没有变化,长期 食用[75mg/ (kg-d), 24周]也不会改变禁食状态下血浆的天冬氨酸浓度, 这可能是由于天冬氨酸在肠道上皮中的髙代谢率所致。因为天冬氨酸与其他氨基 酸的不同之处在于,它是经肠道上皮细胞所代谢,而不是通过肠门脉系统所吸
以紫苏亭为原料进一步衍生制得肟化物SRI Oxime V (图6 -27〉,甜度是蔗 糖的450倍,有很大的发展前途。相比于母体化合物,SKI Oxime V的水溶性得
他们通过CLUSPRO wel> server获得了奇异果素的四聚体模型。二聚体的定 位方式总结起来有两种:--种形成球形四聚体结构;另一种形成线形四聚体结 构,两种定位方式都与可以兼容糖链的存在。两种四聚体模型在组氨酸的位置、 组氨酸的外露情况和带电表面这些方面的性质都与单独的二聚体的一致,糖链并 不会引起位阻现象。在球形结构中,两二聚体之间会形成4个H键,并且每个 亚基都有46个残基位于分界面。而在线形结构中,两二聚体之间仅存在1个H 键,位于分界面的残基数儿乎为球状结构中的一半。球形和线形结构可能就分别 代表奇异果素四聚体的“合”和“开”两种形式。

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