横峰县纽甜
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素：间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时，固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时，起始反应速率低且酶不稳定；pH >6时，平衡得率急 剧下降。在大多数情况下，多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定， 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性，但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中，底物和产物浓度各处均 相等。
Shallenberger认为糖分子与甜受体AH、B系统的几何形状决定了两者间的 复合强度，甜味化合物的构象与构型对味觉刺激起取要作用。那些含有芳香残基 的刚性分子结构，如糖精和氨基硝基苯，如果它们的A—B轨道间距合适的话， 在这方面具有明敁的优势。因此，Shallenberger理论能够解释这些人工合成甜味 剂比蔗糖甜几百倍的事实。糖的甜味感觉只能持续数秒钟，说明其结合力较弱。 如果说甜味分子的立体化学结构对甜受体的配合程度决定其甜度大小的话，那么 甜味分子与甜受体相互作用的速率或许要比复合结构本身的持续性更为关键。
旋= 1:12. 5，w/w)溶解时,可以尽可能地避免在反应过程中产生蔗糖脱氧环化 衍生物。因此，本研究仅以蔗糖和乙酸酐的摩尔比、反应温度和反应时间等三个 因素，分别对S-6-a的合成条件进行优化，结果如图3-29至图3-31所示。图3 -29蔗糖和乙酸酐摩尔比对取酯化反应效果的影响（-丨8*C、7h)图3-30反应温度对单酯化反应效果的影响[蔗糖：乙酸酐=0.95 (mol/mol), 7h]时 N/h围3-31反应时间对单酯化反应效果的影响[蔗糖：乙酸酐=0.95 (mol/mol),25 *C]
在第二个系列试验中，新橙皮苷二氢杳耳酮以每千克体重摄取0、0.2、1.0 或2.0g水平喂养幼小beagle狗2年进行慢性毒理试验（最高剂最组饲料中甜味 剂浓度髙达6% )。试验结果表明，2.0g/kg组动物出现甲状腺蜜鱼增大，有的狗 身上出现甲状腺肿大和增生现象。然而，这种效应是由于二氢查邛酮毒性所引起 的，还是由于代谢大量二氢奄耳酮而引起的可逆性反应，尚未弄淸楚。两个最卨 剂苗:组中有些狗出现了睾丸蒌缩退化现象，虽然还无法准确定量出这种寒丸病变
R3 6-15 环己基氨基磺酸及其钠盐、钙盐和环己胺的化学结构
①甜菊苷在小肠内不吸收；
(三）其他毒理学分析
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因，因此细胞中需有多个该标 记基因（3 ~ 10拷贝/细胞）以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目，通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别，但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%，pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%，PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计，经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
甜蛋白最初均从植物直接提取，但这种生产方式有较多不足之处。利用基因 工程生产甜蛋白不受季节、产地等影响，是一种很宥前途的生产方法。目前这方 面的研究相当活跃，除嗦吗甜、莫奈林这方而的研究成果显著外，其他甜蛋白利 用基因工程生产也在进行中。如美国Nek丨ar Worldwide公司已将Brazzein表达至 玉米中，丨t转基因玉米中能提取lkgBmzzein。美国生物资源国际公司正研究通 过种植和转基因方法生产Miraculin。据报道，H本Asahi Denka Kogyo公司和生 化研究所已将Curculin在转基因植物和大肠杆菌中表达。
鉴评人员对几个嗦吗甜突变样品，与植物嗦吗甜、蔗糖、阿斯巴甜的甜味强 度及口感特征的评估比较，发现有一个嗦吗甜突变体仍具有很髙的甜度，相比于 植物嗦吗甜，它与蔗糖的时间-甜度曲线更接近。另外几种突变体的结果也较 好。这表明对嗦吗甜基因进行改造，可以得到不同甜味特性的嗦吗甜类似物。
