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因本步骤接下来要直接进行氣化,在选择方法时除要考虑到试剂便宜易得 外,还要注意到对下一步氣化反应的影响。酸法迁移完成后需提纯结晶后才能进 行下一步氣化,而碱法迁移因所用胺试剂沸点较低,如叔丁胺的沸点为44. 41, 极易蒸馏除去,所以可免去提纯手段。当然所选悄性溶剂必须与氣化试剂不发生
以2# (kg-d)浓度水平喂养怀孕小鼠6~15d,发现嗦吗甜没有致畸性。活 体外微生物基因诱变试验表明它没荷诱变活性。因为嗦吗甜是可溶性蛋白,有人W 此推测它在肠道内可能具有免疫活性,但经口试验没检测到它的任何免疫活性。
图3 -55 4'-氣-脱氧三氧蔗糖和 图3-56 4 -氣-4 -脱氧- - D -吡喃 受体模型的相互作用 半乳糖苷-丨,4, 6-=氣-丨,4, 6-三
2.受体蛋白识别部位人体甜味受体蛋白存在八个基本的识别部位,分别为B、AH、XH、G,、 G2、G3、04和0,识别部位由15个基本识别点组成,分别为B,、B2、AH,、 AH2、XH,、XH2、G,、E,、G2、Ej、g3、e3、g4、e4x d。
以质量计,相对于2%蔗糖溶液,纽甜的甜度约为丨_倍(以摩尔数计约 为11000倍);相对于5%蔗糖溶液,纽甜的甜度约为9000倍(以摩尔数计约为 丨_倍);相对于10%蔗糖溶液,纽甜的甜度约为_倍(以摩尔数计约为 6600倍)。如图2-46所示,以质萤计相对于蔗糖的甜度,纽甜的甜度为1_ 倍,意味着lkg的纽甜相当于l_kg (10t)蔗糖的甜度。从图2-46还发现, 纽甜的相对甜度随浓度的变化而变化。阿斯巴甜的甜度以质貴计为蔗糖的180? 200倍,纽甜的甜度以质萤计为阿斯巴甜的30?60倍。因此,纽甜比任何?种 目前已商品化的甜味剂都要甜很多。
另一方面,分子内氢键对提髙甜味化合物甜度的间接贡献还表现在:如果甜 味分子的AH基团在形成分子内氢键中扮演受氢体的角色,则可以大大增强AH 基团在和甜受体B基团发生氢键键合时作为H供体的供H能力,从而使甜味分 子与甜受体的结合更为紧密,并最终导致甜度的增加。相反,如果甜味分子的B 基团在形成分子内氢键中扮演氢供体的角色,也会出现相同的效应。例如在 4',6^-二氣蔗糖中,该化合物的疏水性因氣替代而大大增加,并因C-T位上 羟基仍和C-2位上羟基保持分子内氢键连接而使后者受氢能力大大增强,因此 它的甜度可达到蔗糖的3500倍。卤代蔗糖普遍都能建立这种形式的氢键,有些 化合物如三氣蔗糖在二甲亚砜溶液中也存在上述氢键。
由于RGal - U、RGal - lb和RGal -2的19 -竣基相连的葡糖基的C4—0H 为游离羟基,因此不适合作CGTase催化转糖苷反应的受体。A/, vinacea的《 -半 乳糖苷酶催化可选择性地将半乳糖基连至甜叶悬钩子苷的13 - 0 -葡糖基上。
(分解)]。反应方程式为:
(五)脱乙酰基反应条件的优化
天然仙茅蛋白的相对分子质最经低角度激光散射测定为27800,单体的相对 分子质最12491,经分析推断天然仙茅蛋白是两个相同肽链通过二硫键构成的二 聚体。经测定,仙茅蛋白含丨丨4个氨基酸,其中天冬氨酸、亮氨酸、甘氨酸的含 贵较高,没有检测到糖组分,说明仙茅蛋白不是一种糖蛋白。仙茅蛋白的氨基酸 序列见表5 -20。仙茅蛋白及其和麦芽糖结合蛋白构成的融合蛋白都能在大肠杆 菌中表达,但具体情况还未见报道。