屏边县山梨糖醇
基末端的311个氨基?酸序列（pCKKhb只含141个氨基酸）的cDNA序列 (SS-B2),和两个串联作为类KEX2蛋白酶切割位点的LyS-Arg序列，以及用 每菌优选密码子合成的嗦吗甜II基因（tha)和S. cerevisiue的CYC1转录终止子。
由于弱酸高温环境中，4-PAS会发生脱乙酰基反应，或进一步发生迁 移反应得到3，4，6, 3\ 4'-五乙酸蔗糖酯，我们改用碱性乙酰基迁移法。 其反应温度为30 -601，反应温度高于601时副反应发生几率增多，低于 30弋反应过慢（如>10h),我们选取50T为试验温度。具体方法是，20g
波兰的研究者对L -天冬氨酰-1.-蛋氨酸甲酯旁链的构象优先性作了研究, 认为FBDn是优先存在的构象。他们还认为，FnDn也是阿斯巴甜优先存在的 构象。
甘茶甜素（Phylloduldn)是用酶水解法由虎±1：草科（Saxifragaceae)植物八 仙花 Hydrangea macrophylla Seringe var. thundergii ( Siebold ) Makino 叶子天然存在 的糖苷中分离出来的，它在叶子中的含最高达2. 36%。围绕着Phyllodulcin的分 离纯化，已申请了数个专利方法。有一种方法是利用甲醇或乙醇提取，通过调节 1>H及用氣仿抽提法去除色素及Hydrangenol ( Phyllodulcin的非甜同型物）等杂 质，然后用一种非极性溶剂在pHIO条件下进行选择性抽提，可得到髙纯度的 Phyllodulcin 产品。
第二步，制备6-甲基-3, 4-二氢-1, 2，3-1嗯噻嗪-4-酮-2, 2-二 氣化物。取一定量的三氧化硫溶液（20%)，快速搅拌（800r/min)下，约 15min滴入上述溶液中，继续环化一定时间。约20min内，滴加三氧化硫4倍物 质量的蒸馏水，调整水解温度，继续髙速搅拌一定时间，停止反应。反应方程 式为：
Fuganti和Grasselli提出，用/V -苯乙酰基作阿斯巴甜的保护基团，因为 W-苯乙酰基可以很容易用靑霉素脱乙酰酶除去。该生产工艺中，D- PheOMe经外消旋作用后可重复利用，幣个工艺流程简单，且底物回收也简 单，因此可操作性很强，但酶（嗜热菌蛋白酶的粗制品）的回收很难。 Tosoh公司的研究者提出，将产物抽提到非水溶性有机溶剂后，再从反应混 合物中回收酶，但该法酶和产物的回收效果均不令人满意，因此在工业上很 难行得通。
B链的Asp残基被Asn替换后分别得到[ASnKl ]-莫奈林和[ASnw ]-莫 奈林的类似物，它们的甜度分别是蔗糖的7000倍和20倍，而用Abu替换Asp117 得到的类似物[Abi^]-莫奈林完全没有甜味。这表明：位于《-螺旋内的 Asp821被Asn替换后，可能会引起莫奈林分子构象的微小变化，或者更有利于结 合受体；ASpOT位于莫奈林分子内a-螺旋的起始部位，在分子的表面有游离的 办-竣基，能以离子键的形式与受体相结合，可能是莫奈林的活性部位； [Asnm]-莫奈林之所以也具有部分甜味，可能是Asn87与受体以氢键的形式相结 合的结果。此外，还对英奈林仅有的一个CySw的作用进行研究，结果发现：用 Ser替换Cy8w后，得到的[Ser8^ ]-莫奈林类似物的甜度是蔗糖甜度的2000 倍，并且该类似物在水溶液中的稳定性明显下降，与人工合成的莫奈林的构象略 有不同。可以肯定，Cys残基上的一SH基团在保持莫奈林的天然甜味构象方面 起着重要的作用。
其罝换过程可简单表示为：
莫奈林分子在酸性环境中变性所导致的甜味丧失是可逆的，但在中性或微碱 性环境中发生的变性作用则不可逆。在酸性pH条件下甚至因脲变性而引起的甜 味丧失现象，经中和后也有可能得以恢复。在较高pH下发生的变性作用，由于 形成f二硫键导致莫奈林分子发生积聚作用而沉淀析出，还产生相对分子质虽大 于7_的可溶性无味高聚物，这一过程显然是不可逆的。
六、蔗糖衍生物构效关系的研究蔗糖的甜味与其分子上的羟基密切相关，被氣原子取代后的蔗糖衍生物甜度 大大增强。Wiet& Miller报道，萠糖的氣代衍生物仅仅是增强了蔗糖的固有感官 甜味品质，蔗糖氣代衍生物的甜度-时间特性与蔗糖十分相似。对蔗糖进行其他 化学修饰，如甲基化、乙基化、丙基化、丁基化或苯甲基化，通常生成苦味衍生 物。根据氣取代位S的不同以及甜味分子亲水/亲油的平衡关系，蔗糖衍生物具 有强力甜味、甜味、甜苦味甚至苦味等不同风味品质。
