漳州招商局经济技术开发区乳糖

漳州招商局经济技术开发区乳糖 如表2-58所示,用D, L-氨基丙二酸(Araa)取代L-天冬氨酸是改变 /V -端氨基酸而又能保留甜味的第一个例子。Ama分子中氨基与竣基的关系与…

漳州招商局经济技术开发区乳糖
如表2-58所示,用D, L-氨基丙二酸(Araa)取代L-天冬氨酸是改变 /V -端氨基酸而又能保留甜味的第一个例子。Ama分子中氨基与竣基的关系与 通常氣基酸的一样,符合Shallenberger和Acree的AH 一 B理论。用D,L – Ama 取代天冬氨酰苯丙氨酸甲酯分子中的L-天冬氨酸制得的二肽衍生物[126],其 甜度是蔗糖的300 ~400倍,也有人报道是“200倍”或“相甜”。Ariyoshi指出 甜味非对映体可能是D-Ama-L-Phe-OMe,而不是L,L-非对映体。由于手 性中心取代基次序优先性的变ift, D-Ama的绝对构型与L-Asp是一致的。后 来,应用类似的方法制备出D,L-Ama-D-丙氨基酯。D,L-Ama-异丙基
图2 -45 17mg/L纽甜和525mg/L阿斯巴甜水溶液的瞬时甜味分布(2)滞后时间、,即强度达到超过基线水平所需的时间(s):阿斯巴甜 1.3,纽甜 1.5。(3)达到最大钱度所需的时间(s):阿斯巴甜丨2.3,纽甜丨6.6。(4)最大强度持续时间(s):阿斯巴甜6.1,纽甜2. 8(5)结束时间即强度回到基线水平所需的时间(0:阿斯巴甜80.5, 纽甜94. 8 o(6)曲线下总面积(以强度单位x时间表示):阿斯巴甜425,纽 甜49丨。.
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响,更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基(LB)中培养一段时间后,加人IPTG后培养2~3h,大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大,多数在内含体沉积,在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后,大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后, 50%?70%融合蛋白发生解离,这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强,p/约5.4,而核酸酶碱性较强,p/9.4,因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同,甜度是植物提 取Brazzein的2倍,与从植物中分离得到的如-pGlul – Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味,未折垒(unfolded)或折奋错误
仙茅蛋白和奇异果素都具有变味特性,因此对它们进行专门的比较。前面提 及仙茅蛋白的抗血淸只与奇异果素发生微弱的反应,另还发现仙茅蛋白不与奇异 果素的专一性抗血淸反应,这表明仙茅蛋白的抗原决定子与奇异果素的不同。仙 茅蛋白和奇异果素含有5个相同三肽,而在一般情况下,这种情况的出现几率是 非常低的,因此有可能其中某个相同三肽就是变味活性位点。
Polypodosides A没有诱变活性,以2g/kg剂量经口喂养大鼠未发现急性中毒 现象。其甜度是蔗糖的600倍,甜味延绵,带来类似甘草的苦后味。Polypodosides B的结构与Polypodosides A十分相似,只是它在糖抒配基的C – 3位上连有 一个单一的葡萄糖,但Polypodosides B的甜度要比Polypodosides A低得多0 Polypodosides A的商业化开发受到水溶性较低、甜味特性欠佳以及较难收集 椬物的根状茎等问题所困扰,尚有一定的闲难。Osladin也有类似的 问题,此外在P.tWgore植物体中含量又极低,也无商业化开发价值。
图5 – 1所示为嗦吗甜分子三级结构示意图。
由此可见,引起受试动物半数致死的最低摄人量(根据光桥的结果为 8.2g/kg以上)也是人类可能摄人数量的1968倍以上。其计算依据是:
若以摩尔浓度为计算基准,则在阈值浓度时新橙皮苷二氢杳耳酮(n)的 甜度为蔗糖的330倍,柚苷二氢查耳酮(1)甜度为蔗糖的490倍,HDG (III) 的甜度为蔗糖的390倍。由此可见,二氢查耳酮的甜度要比糖精(300倍)和甜 蜜素(30倍)来得大。
虽然嗦吗甜是一种蛋白质,但它对热相当稳定。其稳定性与PH、温度、其 他可溶性物质(如氧气、酸性多糖及合成色素等)的存在与否密切相关。总的 说来,pH较低时,嗦吗甜的稳定性增大,当pH小于5. 5时,即使在100X温度 下加热数小时其甜度也不减弱。因此它适用于各种典型的软饮料(PH2.8~ 3.5),产品可经巴氏杀菌甚至超高温杀菌。蔗糖与葡萄糖的存在能增大嗦吗甜 的稳定性。有些酸性多糖(如角叉胶)的存在会因相互影响而使之甜度变弱, 但明胶能增大其稳定性而不降低其甜度。当pH较髙时,嗦吗甜的热稳定性变 小,但在室温、pH为8 ~9的碱性环境中仍较稳定。嗦吗甜在PH2以下环境中 可感觉到的酸味大于甜味,这可通过中和脱盐(如通过透析作用)而恢复其甜 度。嗦吗甜在PH2. 7?6.0范围内热稳定性很好,而在PH2.8~3.0附近稳定性 最好;可用无机酸或有机酸(如盐酸、柠橡酸、苹果酸或南马酸)来调节pH。
Searfe公司的早期研究表明,没有一种天然存在的氨基酸可代替天冬氨酸, 而且其氨基和羧基团必须保护未取代状态。如表2-55所示,用磷酸根

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