清丰县阿拉伯糖
3-0H/2-0、2-0H/3'-0 和 3-0H/3f-0，由于 AHS、Bs、Xs =角形生甜团 不合适的逆时针方向排列而可以不予考虑。此外，再根据甜味三角理论中八^和 8!?部位间严格的距离限制（0.25?0.40rm0,由1 - OH/3 - 0 (0. 56nm)组成 的AHS/BS对也可以被排除在外，这样就仅剩下3f - OH/2 - 0和2 - OH/3 - 0两 组有可能成为三氧蔗糖AH/B部位的最终候选者。
3.最佳反应条件
表3 -18 三氮蔗糖及其衍生物与受体蛋白的作用部位
4-PAS在系统中的浓度也会影响得率，浓度过低，反应速率变慢，反应时间延 长；浓度过高，加速其他一些副反应，影响到产物的质量。图3-19所示为含 15% ~35%4-PAS甲基异丁基酮溶液的反应情况，其中乙酸浓度为8%,反碎 时间3h，显示浓度25%为佳（得率75% )。
大多数转化体培养72h时嗦吗甜产率达到最高，72h后产率明显下降（图 5-8)。但双转化体TB2bl-44-GD5的产率在72h后仍继续增加，这是由于它 的gdhA启动子与生长期同步表达，而酯酶B2启动子在生长期结束后表达，因 此当晚表达的启动子（如次级代谢的启动子）也能被Aauwnori转录机制识别 时，将一早一晚表达的启动子结合也许就吋以延长基因的表达时间。TGDTh-4 以硫酸铵为氮源培养48h时嗦吗甜分泌量达到最髙，这是因为它采用的 A. awamori的gdhA启动子通常较早表达。
同源建模及对接研究有力地证明了，受体上有两个结合小甜味分子的活性位 点和一个结合甜味蛋白的活性位点。由于甜味化合物的复杂性和多样性，很自然 地，人们会怀疑是否有另外的结合部位存在。确实，在最近的几年里，许多分子 生物学实验，都有助于解释甜味受体和不同配体的相互作用，并为多结合位点的 观点提供有力证据。到目前为止，发现的可能的另外部位主要有两种：一种焙结 合甜赉素和丨actisole (—种甜味抑制剂）的部位，另外一种是结合其他甜味蛋白 的部位。
据分析，它的分子中的於-折奋与月-弯曲的数虽较多，分别为29%和 27%,其余均为自由挠曲。然而，这些仅是理论推测的结果，并非是直接测定的 精确数值。德国柏林的Max Planck学院的研究人员用计算机计算结果表明，嗦 吗甜分子中a -螺旋占10% ,芦-折蚕和/3 -弯曲的占70%，自由挠曲占20%。 显然这些数值与上面的推测相差甚大。
图2-24中，实线和虚线分别表示了不同a值和底物浓度的组合时，G、 与pH的关系。在计算时，因P?2。值很小故用0.02计，因此水的分配对得率 的影响可以忽略不计。图中只幽了 a =丨，Z - Asp和PheOMe = 80mmol/L时的 Yaqy其他情况下Z-ASp-PheOMe在水相的得率很小。由图可知，达到最大平 衡得率时水相pH约为5,比在水溶液合成达到最大得率时的pH低。当《增大 时，则反应物的非离子形态增加，从而L增大。PheOMe和Z - Asp浓度增加都 能使L增大，但增加PheOMe浓度还提髙了合成速率因而效果更好。当pH在
如图2-75所示，一种称为“后向旋转”（rHminvereo)的肽改性法，是将 酰胺结构中通常的羰基和含氮基团颠倒过來。在现有条件下，是连接于内二酸衍 生物上已被酰化的1，1 - 二氨基烷烃来代替通常的酰胺键连基团。D-丙氨酰胺 经后向旋转后得到的化合物，其甜度可增至900倍（表2-51)。2, 2, 5, 5- 四甲基环戊基化合物[94]的甜度很大，而2, 2, 4，4 -四甲基-丨hietane [96]的甜度要弱一些。1, 1 - 二氨基烷烃部分的R或S立体异构体[94]与 [95],它们的甜度相似，但是，经二甲基化后的化合物[97]，其甜度只有 [94]的一半。对于小基闭（如平基）来说，只要立体化学上允许就可进行双取 代。这对于以低成本的外消旋丨，1-二氨基烷烃来制备这些甜味化合物，具有重 要的实际意义。很显然，甜受体在接受“上面”基团时具有一定的灵活性。
当非水溶性溶剂、适萤的水和表活性剂如AOT [丁二酸二异辛酯磺酸钠， bis - (2 -ethylhexyl) - sodium - sulfosuccinate]混合，形成反向微胶团，其中 水相被表面活性剂的极性基团包围，而非极性基团（烷基）指向有机溶剂，通 常酶分子被包围在水相中。这个系统也可看作是二相系统的特例，但这时酶的许 多特性与在简单的二相系统不同。例如，可能W酶表面的水分子结构提高了酶的 稳定性和活性，a -胰蛋白凝乳酶能在异辛烷-AOT反向微胶囊中保持稳定并有 稱活。
