互助县纽甜

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使用产物沉淀法,当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率, 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合,并加人10mg嗜热菌蛋ft酶,起始pH6~8,在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀,该沉淀 得率大于95%。研究还发现,以外消旋化合物为反应底物时,只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe,但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果,Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20),并在1984年完成了中试。
体的4. GV2260,便获得转基因莴苣。从莴苣叶中提取蛋白并做
阁2-24 40^€时,pH和Z-Asp-PheOMe合成平衡得书关系阁 注:①?春-、-△-、-▲-、?□?、-■?表示在不用底物浓度和a值妞合时,Z-Asp-PhrOM*?在有机相的 得牟;②-Z - Aap = PheOMe = 80mmol/L, a = 1;③-A-, Z - Asp = PheOMe = 80ramol/L, a *5;④-▲-,Z - Asp = PheOMe = 80mmol/L, a = 10;⑤-Z - Asp = 80mmol/L, PheOMe = 160mmol/L, a =10;
图2 -2所示为阿斯巴甜的2种分解途径,图2 - 3所示为主要的分解产物。 干燥的阿斯巴甜稳定性很好,只有在极端高温条件下(>15(TC)才会发生环化 作用,分解率可用阿斯巴甜转化成DKP的数里來表示。在105T、120T和 150T下干燥阿斯巴甜的稳定性如阁2 -4和表2 - 1所示。
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构,其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸(pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外,其 余均相同,称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低,只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达,葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100,且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙,因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
由于化学水解缺乏专一性,因此对6-糖苷键的水解需要在特定酶的 作用下才能完成。
只有在极端条件下才发现安赛蜜的分解现象,但成用于食品、饮料上通常不 会遇到这种条件。极端条件下的分解产物主要是丙酮、C02、铵盐、硫酸盐和氨 基磺酸盐。水解时,环结构首先打开,很快就分解成水解终产物。只有在极酸介 质中进行类似通常食品的加工与贮藏,才会分解产生微萤的乙酰乙酸衍生物。
草亭酸。用髙效液相色谱可检测出血浆中甘草甜素和甘草亭酸的含最。用 12.5mg/0.5mL的剂量注射内鼠的静脉,不久血浆中甘草甜素的浓度迅速下降,在 最初的60min内下降速度很快,接者是缓慢的下_,再过120min后浓度稳定在 左右。当注射剂量为5mg/0.5mL时,最初60min内甘草甜素浓度急剧下 降,90min后几乎检测不到甘草甜素c对以口服方式进入机体内的甘草甜素及甘草 亭酸在血浆中的存在情况也做了分析。经口摄取后,30min内血浆中甘草亭酸浓度 达到最高值,240min后浓度开始下降。甘草甜素浓度的增加速度中等,在最初 240min内甘草亭酸的浓度大于甘草甜素,240min后它们在血浆中的浓度趋于相等。 甘草甜素的分子质萤较大,在肠道内先被转化为甘草亭酸后才被小肠吸收。
第二节甜蜜素
L -天冬氨酰-D-丙氨醇及-D-丝氨醉酯化合物[57] ~ [65]具有较 强的甜味(表2-47)。与前面所述的一样,随R基闭碳数的增加,化合物的甜

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