经济技术开发区麦芽糖醇
W有人做过2次软饮料试验，结果很能证明阿斯巴甜的损失对产品的可接受 性能的影响很小。有个试验是依次减少阿斯巴甜的使用量，以模拟贮藏过程中阿 斯巴甜的逐渐损失。当阿斯巴甜数虽减少至只有那些使用蔗糖的饮料甜味的 55%时，发现使用阿斯巴甜的饮料（包括可乐、柠檬汽水和无酒精饮料）的品 质仍然良好。
第3种合成法得率较高，其合成路线如图2-19所示。该法的特点：①实现了完全彻底的区域专一性缩合反应。②使用新的天冬氨酸衍生物N -硫代羧酸酐（L - A8p - NTA)。③在3个步骤内完成合成全过程。- a-Asp PheOMe (阿斯巴甜)+ p - Asp PheOMe (阿斯巴甜的十异构体>图2 - 18以AT -苯氧羰箪-L-天冬氨酸酐作为天冬氧酸衍生物的阿斯巴甜合成路线图2 - 19以L -天冬软酸-W -琉代羧酐为天冬氨酸衍生物的阿斯巴甜合成路线
根据Slootstra等人对嗦吗甜的研究结果推测该位点对仙茅蛋白的甜味起决定 作用，但这两个氨基酸构沏与阿斯巴甜在溶液中L-型不同，而且，GNA也有一 个类阿斯巴甜位点ASP35 - Phe21,但并不具有甜味。
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
相对于蔗糖、葡萄糖等可发酵碳水化合物型甜味料来说，链球菌(Streptococcus 咖廳) 作用于甜菊苷所生成的酸较少，表4-4所示为这方面的部分研究 结果。
Lethco和Wallace的研究结果似乎比较中肯，作者的试验结论认为糖精可能 的代谢产物是由于糖精化学结构的轻微破坏产生的，而并非由于酶的作用引起 的。但在试验过程中并不排除试验品略带些杂质的可能，作者也没注意试验过程 中发生水解的可能。
2C6HmNH2 +C1S0,H ^HuNHSOjNHjQH,, + HC1
图3-11 .二:氣蔗糖与蔗糖在甜度-时间曲线方面的对比（PH7.6、20*11)
体的4. GV2260，便获得转基因莴苣。从莴苣叶中提取蛋白并做
出邻亚磺酸苯甲酸屮酯，约lh后用H 酸测试反应终点应褪色。然后加人甲 苯，通氣气氧化，以2%联苯胺乙醉溶 液测试显深墨绿色为终点，静罝分层， 有机层为邻甲酸中酯苯磺酰氣平苯溶 液（简称磺酰氣）。依次将磺酰氣和水 加人胺化锅，在丨0尤时加氨水胺化， 温度可达70T，PH9以上，静置后取 下层铵盐液为邻甲酰苯磺酰亚胺铵溶 液（简称胺化液）。将胺化液放入酸碱 化锅内，加人甲苯和30%的盐酸到pH 为1，酸析后降温至20T.，取甲苯层 水洗去氣化铵得不溶性糖精甲苯溶液。 将此溶液加热，加入碳酸氢钠中和， 调PH至3.8 -4.0,静置后取水层， 加活性炭脱色、过滤，调滤液pH至 7，在70 ~ 75弋减压.浓缩，趁热过滤， 滤液经结晶、干燥得糖精钠。
