宜宾市甜蜜素
于是，他们对奇异果素做了定点突变实验。考虑到丙氨酸不会产生特殊的空 间和电子效应，他们用丙氨酸替换组氨酸-30和/或组氨酸-60。结果发现，所 得突变体和重组奇异果素的分子大小和糖链结构类似，并且每种突变体都如期地 以二聚体形式存在。有趣的是，感官测试结果显示，0.5mg/niL的H30A和H30、
如图3 -2所示，三氣蔗糖在水中的溶解性很好，20T时的溶解度为 28.2%;但在脂肪中的溶解度很低，几乎不溶于玉米油中。在使用乳化剂的含油 或脂肪的多相物料系统中，三氣蔗糖将进人水相，这方面与蔗糖相似。
甘草甜素为白色结晶性粉末，分子式C42H62Ol6，相对分子质鱼822. 92。与 二氢查耳酮相似的是，其甜刺激来得较慢，去得也较慢，甜味持续时间较长。少 世甘草甜素与蔗糖共用，可少用20%的蔗糖而甜度保持不变。甘草甜素本身并 不带香味物质，但有增香作用。熔点（分解）220T，水溶液呈弱酸性，在酸作 用下会水解失去甜味。甘草甜素难溶于水和稀乙醇，易溶于热水，冷却后呈黏稠 状胶冻。不溶于油脂，溶于丙二醇。
通过转基因莴苣和番茄均可生产莫奈林，但两者植物所使用的启动子并不相 同。在转基因番茄表达使用的是E8启动子，这种后动子是可定向使莫奈林基因 在番茄中表达的水果专用启动子。而在转基因莴苣中表达则使用CaMV启动子， 这种启动子在许多植物器官中都具有活性。把含有莫奈林带E8启动子或CaMV 启动子的基㈥引入中即可。蛋白质从西红柿果皮或莴苣叶中提取。 对提取的蛋白质做western印迹分析和EL1SA,结果表明，在带有E8启动子和莫 奈林基因的转基因西红柿果实和带有CaMV启动子和莫奈林基W的转基因莴苣叶 中均可检测到重组莫奈林。用乙烯处理转基因两红柿，可使西红柿果皮中莫奈林 的产谊提高至23.9?^丨鲜重，诚著高于未经乙烯处理的转基因番茄。
与5/值的不断增大范围内，几乎恒定的开始 作用时间（fc)反映了分子通过整个有序队列的时间。这种情况与机理2不一 致，在机理2中分子从口水扩散到离子载体激发处的时间与其浓度有关。
表2 -70 各种构象布居数的计算值和实验值
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
