武都区甜蜜素

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4.评价潜在神经毒性和免疫毒性的毒理学试验
很有趣的是,改性化合物中硫代基SO-Na?竟是口感良好的甜分子甜蜜素 (Cyclamate) R-NHS03Na^ (R=环己基)中的一部分,由此可见,甜蜜素中 R基团被其他烷基或环烷基取代时,该分子的甜味仍然保留。
三、阿力甜的化学合成技术阿力甜的化学合成可以分为三步,首先是2, 2, 4,4-四甲基-3-硫化三 亚甲基氨的合成。在冰水浴条件下,将二氣化硫缓慢加人到二异丙基甲酮中,反 应温度不超过30弋。当反应生成的HC1开始减少时,再反应30min后终止反应, HC1用真空泵抽出。这一步亚氧基硫氣的产率能达到90%以上。将得到亚氧基 硫氣溶解在四氢呋喃中与叔丁基钾四氢呋喃溶液混合,搅袢反应lh,反应结束 后,用丨mol/L的盐酸调pH至3.0,加水,同时用乙醚提取反应产物,过滤、干 燥后得到2,2, 4,4-四甲基-3-硫杂环丁酮,产率也能达到90%以上。在密 闭反应釜中让2, 2,4, 4-四中基-3-硫杂环丁酮、盐(最好是磷酸盐等弱酸 盐)及氨衍生物在100T以上的温度下进行反应,2,2,4,4-四甲基-3-硫 杂环丁酮和氨衍生物的缩合物,产率可达到90%以上。为避免高温、高酸性条 件下的副反应,此反应所用的盐,其pKa最好在1?4。第二步,反应产物2,2,
糖精已有100多年的食用历史了,这也可用来判定它是否会引起人体致癌的 可能。约有20份关于这个方面的调杳表明糖精与人体癌症没有直接联系。
2.计算机模拟识别
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸(甲硫氨酸)[图5-24 (2)], 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸,经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化,因此用快速定点突变将核酸酶基因(SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸(正亮氨酸)对核酸酶活性没有影 响,SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点,这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因(SW基 因)插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间,得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生,蛋白质在lac启动子的控制下生产。
~O- S. muians ZAHT - -A- - 5. muians SB25 - -O- - 5. muuws SL - 1 -? -B- ? - S. mutans NS - XIII
用4-11环糊精葡糖基转移酶设对甜菊苷转糖苷反应得率(一O—)及 环糊精世(一Q—)的影响 反应条件除坏蝴精葡糖基转移酶量外,其余《图4-9。

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