盈江县甘草甜素
蔗糖浓度/%
最近，研究人员还发现了一种NAS的同种异型物一NAS-2。仙茅蛋白2 的cDNA已克隆，其核苷酸序列也被测定。尽管，仙茅蛋白2的推测氨基酸序列 与NAS的相同，研究人员发现两者的核苷酸仍存在一个不同之处。Maiko Suzuki 等尝试了在￡：.co/i中表达重组仙茅蛋白1 (过去被认为是Cimnilin)和仙茅蛋白 2。仙茅蛋白1和仙茅蛋白2分别在E. coli中表达，然后用氧化重折叠方法重新 组合，从而获得仙茅蛋白的二聚体。可是，无论是仙茅蛋白1的同型二聚体 (仙茅蛋白丨-1)还是CurcuUd的同型二聚体（仙茅蛋白2-2),都未能引起 甜味，也未能起味道修饰作用。
其中1997年，Kirin Co. ( Kanagawa,日本）的Kondo K等人的研究成果最为 引人注目。他们将人工合成的莫奈林基因克隆至产阮假丝酵母(CandUia utilis)细 胞内进行表达，莫奈林表达水平达到细胞可溶性蛋A的50%，莫奈林得率达 10mg/g湿酵母，该得率与从植物提取的最大得率相当，并且所得的莫奈林分离 纯化工艺非常简单，所用的C._7i5又是食用性酵母，因此采用该方法将能实现 英奈林的商业化生产，从而大大推进兑奈林的商业化开发进程。这里对该研究做 一介绍。
第二章高效甜味肽
纯嗉叫甜
不同的Candida utilis菌株电脉冲转化的效率有较大不同。将Bgl D酶切后的 PCLRE2通过电穿孔转化至ATCC9256和ATCC9226，都能得到CYH抗性菌落， 多拷贝载体DNA也串联整合至rDNA区，但转化率都不到ATCC9950的10%。 整合至ATCC9256的pCLRE2拷贝数为6~8，整合至ATCC9226的拷贝数为 5-9,整合至ATCC9950的拷贝数为10?12。
(四）苯酐二硫化物法
环己胺的毒性是决定甜蜜素日允许摄人最ADI值的依据。中毐现象是出 现T睾丸萎缩、睾丸重萤减少等现象。在处理有关甜蜜素和环己胺试验数据 时，这是唯一的也是二直出现的毒性，它已引起人们的关注。但在大鼠身上 进行的大剂萤试验结果是否适用于人体很值得怀疑，因为大剂萤生物试验对 人和动物所出现的结果并不一样，在人体中只有很有限的甜蜜素经代谢作用 生成环己胺。
五、利用固定化酶法合成阿斯巴甜
后一种假设需要些条件，它至少要求甜味与苦味受体同时存在于一个细胞 内。对同时具有甜味和苦味的甲基a - D -吡喃甘錤糖的研究证实了这个观点。 如果分子确在受体上两端极化，那么用蔗糖浓溶液预饱和甜受体就能阻止另一种 方式的结合。如果分子同时分别分配给甜味、苦味受体细胞的话，则对它们各自 的结合方式不产生什么影响。当用蔗糖预饱和舌头时，具有苦味的甲基a-D- 甘露糖苻的苦味会减小些，而同样悄况对奎宁（纯苦分子）的苦味却不产生什 么影响。因此，同时具有苦味和甜味的甲基a吡喃付孫糖苷能同时结合甜 受体与苦受体，用蔗糖预饱和一种结合方式（如与甜受体结合）就会影响另一 种方式的结合（如与苦味受体结合>。从另一个方向来进行这方面的实验，如用 奎宁来预饱和会得到同样的结果（见图1-35)。因此，至少有些甜受体与苦受 体之间的距离极近，在0.3~0.4nra范围内。H前，一个分子具有不同的结合方 式这种观点是许多假说的主题。受体本身还是假说的实体，各种有关它们的本质 的理论是通过对有味分子底物的化学研究建立起来的。
