池州市果葡糖浆

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以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针,与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照,对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明,在各转化体的表达盒没有发生重 排,各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
(二)甜菊苷向甜菊双糖A苷的转化1977年,日本田中等人成功地通过酶水解,将甜菊苷转化成另一种天然双 蔽苷Ru丨)usoside (我国华南地区截薇科植物Rubus suavissimus的叶子中含有这种 糖苷,参见本章第五节),然后再通过三个步骤即可转化成双糖A苷,产率为 75%。甜菊苷向甜菊双糖A苷转变的化学途径见图4-16。
由于水分、pH和温度的综合影响导致阿斯巴甜的分解,会引起甜味的逐渐 丧失。但这不会产生怪味,W为其转化物均无味。图2-8 ~图2-11所示分别 为阿斯巴甜在PH4.5、3.7、3. 2和3.0溶液中的稳定性。
髙甜度的肽类化合管甜受体可以再接受一个连接于L-天冬氨酰上新增加的氨基酸,但在立体空间 上仍有所限制。因此,三肽化合物不如母体二肽化合物甜。通过天冬氨酰基芦- 竣基团扩展的三肽[151],同样没有甜味。
20世纪80年代中期,国际上曾组织16位知名专家组成的专门小组,对三 氣庶糖的安全性问题进行权威的评判。这16位专家分别来0毒理学、肿瘤基因 学、临床毒理学、基因毒理学、代谢学、生物化学、遗传毒理学、生理学、营养 学、血液学、儿科学、毒理评价学、神经毒理学和免疫学等各个领域。他们对所 提供的毒理试验数据进行专门的讨论和审议,最后确认“三氣蔗糖对于广泛的 用途来说是安全的”。美国FDA于1998年3月21 R批准三氣蔗糖的食品添加剂 地位,1994年世界食品添加剂联合专家委员会(JECFA)批准的三氣蔗糖ADI 值为 15mg/kg。
(5)限制件酶切位点缩写分别为:H, Hind丨;B. Bamll I ; S, Sal I ; X, Xba I ; N, Nco |。
Boeslen等催化还原N -苄氧羰基-L - a -天冬氣肤-L -苯内氨酸-丨-甲 酯和3,3-二甲基丁醛制备纽甜。将一定摄的苄氧羰基-L-a-天冬氨 酰-L-苯丙氨酸-1 -甲酯和3,3-二甲基丁醛加人到甲醇与甲基异丁基甲酮 (甲醇含量为45% ~90%质量比)的混合溶剂中,同时加人2%?丨0%的碳钯催 化剂,先通氮气一段时间再通氢气反应,反应温度26~65t,常压下反应,反 应持续1?20h。反应结朿通人氮气终止反应。过滤去除催化剂,滤液中加入足 量的水,在旋转蒸发器上减压共沸蒸发去除有机溶剂甲醉和甲基异丁基平酮,蒸 发温度为25~7(TC,过高会有副产物的产生,过低则不容易去除有机溶剂。然 后冷却到40尤以下结晶得到目标产物纽甜,可以用冷水冲洗或重结晶制取更卨 纯度的纽甜,晶体在80T以下减压干燥。干燥温度高于80T可能会导致纽甜的分 解或副产物的形成。整个反应过程,副反应少,产率高(>95%)。类似的还有用 /V -甲酸签_ L _a _天冬氣醜-L-苯丙氣酸_ 1 _甲醋、N-甲基-L -a -天冬 氨酰-L-苯丙氨酸-1 -甲酯、苄基-L-a-天冬氨酰-L-苯丙氨酸-1 -甲 酯、/V-对苯基径氧基碳基-L-cr-天冬氨酰-L-苯丙氨酸-1 -甲酯等进行纽甜 制备。
五、纽甜的安全毒理学分析

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