白云鄂博矿区麦芽糖醇
经RNA印迹分析知tha基因在各转化体中的转录水平，比对照<4. nidulans的 芦-肌动蛋白的髙。双转化体TB2bl -44 -GD5的嗦吗甜基因转录水平最高， B2-嗦吗甜融合mRNA转录大小为1.9kb，与预计结果相同。以pcbC为启动子 的TCTh -2转化体的表达盒中该DNA片段对应的B2基因5,端只有105bP而不 是其他表达盒中的615bP,因此转录的B2-嗦吗甜mRNA较小（1.4kb)。狹线 印迹分析发现在转化体TGDTh-4、TB2bl -44、TGP -3中的嗦吗甜mRNA水平 在24~48h内最商。转化体TCTh-21 (启动子为pcbC>在整个发酵过程中的表 达水平都很低。
AH、B、X甜味三角理论，是目前用来解释甜味分子构效关系最为有效的理论体 系。以该理论为指导并结合计算机模拟技术，对甜味分子的AH、B、X生甜团进行 分子识别，可以在分子水平上成功解释三氣蔗糖等作为强力甜味剂的结构本质。
合成时，.首先将L -天冬氨酸与甲基乙基磺酸酯在45 下于NaOH-CH3OH介质中反应生成硫碳氨基甲酸乙酯，后者于25*C下与PBr3反应得 到稳定的衍生物L - Asp - NTA晶体，得率高达90%。将L - Asp - NTA与 L - PheOMe ? HC1在特定的pH与温度下缩合生成纯净的a - Asp - PheOMe (阿斯 巴甜），得率63%。这种缩合反应只生成构体-?种产物，具冇很大的优越性。
表2 -26 HPLC分析得到的纽甜产率1
表4-S 葡糖基转移酶处理前后甜叶菊提取物甜味成分的变化单位：质量分数
当带嗦吗甜基因的质粒转移人酵母，在选择性培养基上培养一段时间后， 在相应的培养基中发现了甜味嗦吗甜A、B,且分子质粗均与成熟嗦吗甜的分 子质量相同。嗦吗甜I虽用同样方式生产，但没有出现在培养基中，该结果与 它不能在体外折叠相符。由此可以看出单个氨基酸变化对蛋白质结构影响 很大。
(1 )采用 土 chrysogenum 的 B2 培动子（2)采用 P. chrysogenum 的 pcbC 启动子 (3) /l.rjwamori 的 gdhA 肩动子（4) /!? n/rfuimM 的 gpdA 启动子
四、利用环糊精葡糖基转移酶改性甜菊苷
本法只需以葡萄糖和蔗糖为前体，但要通过发酵产生G-6-a，这是一个昂 贵的过程，因为它需要杀菌操作及分离除去G-6-a中的葡萄糖,：此外，虽然 果糖转移酶反应可以在髙底物浓度下迸行并获得较高得率的S -6 - a,但分离提 纯S-6-a则是困难的，因为所有试图结晶出S-6-a的努力都不成功，它只能 通过色谱分离得以纯化。
