普洱市果葡糖浆
二肽系列化合物的结构与甜小的R,基团更合适。有趣的是，在手性中心含两个甲基的同型物[7]仍具有明 显的甜味，这表明“前-L” (Pm-L)型甲基的重要影响并未被第二个甲基所 消除。在氮原子上的甲基取代或使甲基移至碳原子上将导致甜味的丧失。R2 基团经常"了以变化，如用呋喃基[10]和环己基[11]来取代，也可用碳原子 数在5个以内的简单无环烷基来取代（[12]-[丨4])。
一年的慢性饲养试验以大鼠和狗为试验对象，两年的致癌性试验以大鼠和小 鼠为试验对象。用大鼠做的一年和两年的致癌性试验包括其父代和母代在交配前的 接触以及宫内接触，试验的动物从怀孕、分娩前和分娩后的发育，以及整个的成年 期都在接触纽甜。给大鼠添加剂童为lg/(kg ? d),给狗添加剂量为0.8g/(kg . d) 的纽甜所做的一年慢性试验没有显示有靶器官的毒性。两年的致癌性试验用宫内接触 方式给大鼠添加剂置达lg/(kg*d),或小鼠剂量达4g/(kg*d)的纽甜，也没有发 现靶器官的毒性或致癌性o
(三）阿斯巴甜的溶解度
二聚体奇异果素的结构模拟表明其有两种可能具有代表性的模型。其中-个 模型的组氨酸-30位于两个单体奇异果素亚基的分界面。单体奇异果素不具备 此活性，因而奇异果素须以二聚体形式存在才能产生味道修饰作用。因此，含咪 唑基的侧链很冇可能影响二聚体中亚基间的相互作用，并在奇异果素通过质+化 引起味道修饰作用这一活性中扮演重要角色。
在我国，有人先后选用了毕赤酵母系统中的分泌型表达载体pPIC 9K及胞内 表达载体PP1C3.5K进行莫奈林表达，结果是，分泌型表达菌株能较高地表达莫 奈林，但没有甜味活性，而胞内表达的英奈林有活性，其产最达到1.8g/L。
值得注意的是，三氣蔗糖-3,, 4#-环氧化物是不甜的。由于环氧化作用所 导致的呋喃环构象形变，并不足以抵消三氣蔗糖和受体模型之间的色散作用，这 就意味着果糖基的3#-oVl是构成甜味AHs/BJ、t的必需部分。同样，2，r-二 氧-2，1'-二脱氧-甘餌蔗糖也不甜，说明葡糖基的2-OH也是蔗糖衍生物甜 味所必脔的。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
酯基苯磺酰説。将苯磺酰氣酸胺化后冉酸化即为糖楮，再与NaOH或磷酸氢钠反应
已知TCK只有在亲水的溶剂中才能高度溶解，但在保证酶解反应能得到 必要的水的前提下，a-半乳糖苷酶却被证明在与水不互溶的有机溶剂中， 最稳定并具有最高的活力。这个矛盾，可以通过使用被含水缓冲液预饱和的 有机溶液时得以解决。研究发现，高水混溶的溶剂如二氣六环、丙酮、甲醇 和四氢呋喃等，即使使用高达30%的含水缓冲液进行预饱和，也不支持 a-半乳糖苷酶的水解反应。但在含水缓冲液预饱和的正丁醉、甲基异丁基 酮和乙酸乙酯三种溶液中，TCR的溶解度均达到50%以上。这些溶剂同时 也支持a-半乳糖苷酶的活力，只是三者对三氣蔗糖的溶解性存在很大的差 別，如表3-9所示。
阿斯巴甜在食品或饮料中的主要作用表现在以下五个方面：①提供甜味，口感类似蔗糖。②能量可降低95%左右③增强食品风味，延长味觉停留时间，对水果香型风味效果更佳。④避免营养素的稀释，保持食品的营养价值。⑤可与蔗糖及合成甜味剂一起混合使用。
