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回民区糖精钠
4-?人5溶于丨00111丨.甲基异丁基酮,加热至50弋,再加人3mL叔丁胺,反应 4~6h,浓缩后加庚烷冷却结晶,过滤、干燥得到白色晶体c图3 -20所示 为4 - PAS在叔丁胺催化下得率与反应时间的关系,可见此条件下反应5. 5h
中,F,代的泌尿膀胱中发现了明显的具有统计学意义上的肿瘤病变现象。
y-(% ) = 2(ZA]:^7^) lA - ^ [ZA]_ [PM『丨(2 -叫 4 = a([ZA]: + [PM]i) (2-29)
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响,更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基(LB)中培养一段时间后,加人IPTG后培养2~3h,大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大,多数在内含体沉积,在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后,大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后, 50%?70%融合蛋白发生解离,这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强,p/约5.4,而核酸酶碱性较强,p/9.4,因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同,甜度是植物提 取Brazzein的2倍,与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味,未折垒(unfolded)或折奋错误
收。在为1kg体重提供丨g蛋白质的正餐中加人阿斯巴甜(34rng/kg剂量)的试 验发现,加与不加阿斯巴甜对血浆中天冬氨酸的浓度没有多大的影响。
1%5年,美国Searle有限公司的Schlatter偶然发现了一种带甜味的二肽化合 物——阿斯巴甜。从此开始,以阿斯巴甜为原型,人们研究了 1000多种与之相 关的二肽及二肽同型物,以期获得一种更为理想的高效甜味剂。本节对这个十分 活跃的研究领域的进展与动态做一详细的论述。
2.计算机模拟识别计算机模拟技术进一步证实了以上观点的正确性,并肯定了果糖基部分在充当 蔗糖生甜团X功能部位的重要性。模拟结果表明,蔗糖分子中确实存在上述两对 AH/B双官能实体,Bdr-OH/2-O和y-OH/2-O,前者连接三个Kiei?疏水部位 X于r-H、6-H和后者连接两个这样的中心于厂-H、6-H,而且,这些疏 水部位X与AH、B基团组成甜昧三角形生甜团时的构象均与预期的顺时针方向一致。
已有100多个试验结果证实了三氣蔗糖的食用安全性,没发现三氣蔗糖及其 副产物的任何不利影响。即使以很髙的剂最(丨6g/kg)喂养啮齿动物终生,也 可确认其安全、无毒性。而这个16g/kg的剂萤,相当于人体每天摄取1801碳酸 饮料所包含的三氣蔗糖数摄。
Cla, Ani^r的葡味淀粉_启动子;

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作者: 中国甜味剂网

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