沿滩区山梨糖醇
在莫奈林蛋白质分子中，以a-螺旋结构形式存在的比例较小，以於-折奋 构象存在的比例则较大。如图5-10所示的三级结构中，A链与B链可看作是两 个不同的区域，A链含有1个螺旋结构和丨个於-折叠结构，而B链包含3 个泠-折叠结构和丨个/3-螺旋结构。
三氣蔗糖的甜度是蔗糖的400?800倍，其甜味纯正，不带任何不愉快的苦 后味或金属后味。
转化菌株TB2bl -44中已含有B2作启动子的表达盒，再经质粒pG丨)71 (该 质粒含有gdhA启动子和潮霉素抗性基因作标记基因的表达盒）转化得到双转化 体（double transfonrnin丨），从中选择产率较高的双转化体TB2bl - 44 - GD4、 -GD5、-GD6、-GD7在MDFA优化培养基摇瓶培养后达到最高的表达水平
一、仙茅蛋白的化学结构
1999年，我国有人采用原核生物偏爱的密码子合成了编码单链莫奈林的基 因，使其在大肠杆菌中得到高效表达，奂奈林达菌体可溶性蛋白的20%。在此 基础h，又对单链莫奈林基因进行定点突变，获得突变莫奈林基W，其产物甜度 是蔗糖的4500倍，较天然莫奈林甜度（是蔗糖的3000倍）有显著提髙，产量达 240mg/Lo
用溴化撖(CNBr)将B链蛋氨酸旁边的肽键切断，释放出八肽（Lys-Lys- Thr-Ile-Tyr-Glu-Asn-Glu),残余蛋白质分子的甜味彻底丧失。Frank等人 用同样的方法从A肽链C -端切断八肽碎链并分离开，但未报道对甜味的影响悄 况。有人通过甲基化法考察莫奈林分子中赖氨酸残基对甜味的影响，发现 20% ~40%的赖氨酸残基甲基化后尚不会引起甜味的完全丧失。但随者甲基化率 的提高，甜度会逐渐卜'降直至最终消失。
(二）甜菊苷的稳定性甜菊苷溶液在PH3 ~9，l(xrc条件下保存lh未发现有明显的甜度降低现象， 但在pHIO环境下分解较多（表4-3)。甜菊苷在酸或盐溶液中性质比较稳定。 含有1. 8%乳酸的0. 1%甜菊苷溶液在80T下扩存5h没有发现甜度降低或分解现
根据图3-31可知，低温长时间反应有利于S-6-a的形成。但当反应时间 大于6h时，“相对S-6-a值”增长缓慢，继续延长时间对反应对提髙S-6-a 得率并无明显效果，因此选择6h为最佳反应时间。
