湖北甜蜜素
阁3 -49 4,丨\ 4’，6、四氣-4, 4'，6,-四脱氧-半乳糖基-蔗糖的合成蔗糖的6，\\ 6^-三氣衍生物其甜度是蔗糖的25倍，但当其2-羟基被氯 取代后（图3-50)，并经构型转化成为甘露糖异构体时，生成的2，6\ r, 6'-四氣衍生物就与奎宁一样苦。这证实了 a-羟基对保持甜味很東要，而且强 调了甜味剂生甜闭三角形的排列有着严格的空间要求。为了提髙D-葡萄糖、麦 芽糖和海藻糖的甜度而引人氣取代基团，制备了诸如6 -氣-6 -脱氧-D-葡萄 糖、4', 6'-二氣-4\ 6、二脱氧-麦芽糖和4，6-二氣-4，6-二脱氧-海 藻糖之类的化合物，但均未取得好的效果，这些衍生物有的还不如母体糖甜，而 更多的却是苦的。人们也对4 -氣-D -半乳糖及简单的糖苷衍生物的甜味特性 做了鉴定，它们同样没有甜味。这更证实了横跨蔗糖分子的羟基团，对维持蔗糖 的甜味十分重要。图3-50 2, 6\ r, 6'-四氧-2，6\ 6、四脱氧-过餺-蔗糖的合成
为确定变性酵母嗦吗甜能否在体外折奋成甜味构型，先对已被还原的变性植 物嗦吗甜进行折叠复性预备试验。植物嗦吗甜分子中有8个二硫键（图5-1), 因此稳定性很好，但同时也使其还原和复性都很闲难。Ellman’s试剂[5, 5# - dilhiohis - (2 - nitrobenzoic acid)]的二硫键还原过验证实了植物味吗甜的二硫 键对还原作用很稳定：2个稳定的二硫键需在37弋、PH9、8moI/L尿素中经 50mm?l/L (3 -巯基乙醉作用2h才能完全被还原。
从图中可以看出，位于果糖基单元的i.'-ch2 (x4s)和r-ci (X8S)这两 个毗邻的疏水部位和受体蛋白质的X丨（4是指从蛋A质N末端数过来的甜味蛋 白受体中与甜味分子疏水基团X结合的氨基酸残基侧链的序数，下同）和W氨 基酸残基侧链分别相互作用，三氣蔗糖葡糖基单元上轴向的4-Cl (X5S)则和 <氨基酸残基侧链相互作用。而且，果糖基单元上的< -0H以质子供体 (AH4s)的形式与）C氨基酸残基侧链形成额外氢键。该氢键C0CT……H0 (0. 28nm, 160°)的形成，要求呋喃环的假旋转和分子内糖苷键C, - 0 - Cr的轻 微转动，这可能得到在6-0H和6'-C1间所形成的弱分子内氢键的帮助。位于 果糖基单元的&-C1因此占据了可与受体活性部位相互作用的位罝，从而有利 于甜度的增强。
2-90 (3)]中，其构象中的丨）区域与前两种相比空出许多，但其甜味只有蔗糖 的3000倍。由此推断，D区域（图2-91)的填充比例与二肽甜味剂的甜度密 切相关。
蔗糖的能量值为16.7kJ/g,阿斯巴甜为16.7kJ/g，纽甜<1.2kJ/g，根据这 些数值可以很容易地计算出，含100g/L蔗糖的饮料能虽为1700kJ/g，含 525mg/L阿斯巴甜的饮料为8.92kJ/g，含17mg/L纽甜的饮料则小于0. 02kJ/g。 也就是说，用阿斯巴甜的饮料所含能量比用蔗糖的低0.52% ,而用纽甜的饮料 所含能S比用阿斯巴甜的至少低0.22%，比用蔗糖的至少低0.001%。从实际效 果看，可认为纽甜是无能量的甜味剂。
(三）转化条件的优化
E8,播/】丨丨?专—?性熟化切动子（toinalo fmit - ripening specific promoter)；
(-)三氣蔗糖的甜味特性
(二）质粒构建
1980年，Sweatman和Renwick用经过系统安排其生活方式的白鼠做试验， 观察糖精摄人后在机体血液、尿和各组织中的分布。他们让白鼠摄入含 0% ~10%糖楮的饲料维持22d，跟踪在24h内血液中糖楮浓度的变化情况及糖 精在各机体组织中的分布情况。研究发现在肺、肝、肾、脾和肾上腺中的浓度较 髙，肠道、肾、泌尿膀胱中的浓度较机体整体平均浓度髙，膀胱与尿中糖精浓度 比值为1:100。据此，作者认为糖精通过尿向膀胱的扩散渗透率有限。这一结论 与他们的早期结论一致，但与Co丨burn所报道的正好相反，因Colburn认为白鼠 膀胱对糖精的吸收率很明显。这一差异的部分原因在于两个试验对动物膀胱的操 作控制情况不同，Kemvick和Sweatman所采纳的方法是用镊子或轻轻触摸膀胱以 排出尿，这样造成尿的表观渗透率增大。
