卧龙区木糖
图4-10比较了两个酶反应体系中可用简单的离心方法分离的残留淀粉量。 由于挤汛膨胀淀粉以悬浮状态存在反应混合体系中，因此大多数残留淀粉经离心 (3000g, lOmin)得到分离，而传统体系中残留液化淀粉很难分离。
活力，包括手性分子之间巨大的甜度差异。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
另外进行了一个长达52周的试验，分别使用100%阿斯巴甜、阿斯巴甜与 糖精混合物、糖精、蔗糖的软饮料。仅用阿斯巴甜的可乐饮料5T藏于5弋、20X. 和30T的环境中，混合使用糖精-阿斯巴甜的可乐饮料IT藏于20尤环境中，单 独使用糖楮或蔗糖的贮于室温中。对4种含有阿斯巴甜的可乐进行分析，结果表 明在各种贮藏温度下，pH为2. 8?3.0的饮料中的阿斯巴甜首先出现分解现象。 还发现在5T条件下贮藏的使用了阿斯巴甜的饮料，与单独使用蔗糖的饮料在 “适口”与“甜度”方面并没有差别。含阿斯巴甜的可乐在5T、201下贮藏26 周后，其可接受程度很好。
图3-30显示，低温对蔗糖C-6位的单乙酰化有显著效果。其原因可能在 于，在低温下各反应基团的活性都下降，蔗糖其余游离羟基活性被钝化，而最活 泼的C-6羟基此时尚有反应活性，因此S-6-a的得率较高。薄层色谱结果也 表明，随宥温度的升卨，反应产物渐趋复杂。当反应温度髙于0T时，薄层上出 现3个以上的斑点，其中S-6-a的斑点出现拖尾现象，斑点颜色也很浅。从图
图6 - 9 80T时糖精钠的水解曲线
基间二硫键是Neoculin异型二聚体相互连接的歌要条件。这样的结构特征使 Neoculin的结构有更大的可变性，并有助于Neoculin在实现构象剧烈变化的同时 保持其二聚体结构。综合观察结果——Neoculin溶解于纯水（pH 7.0)也能产生 轻微的甜味，研究人员推测，Neoculin的结构是处于开和合的动力平衡状态中 的，中性环境和酸性环境均会破坏Neoculin的这种平衡状态，使结构分别转向闭 合和打开的状态。但只有当分子处于打开状态，才可产生强烈的甜味作用。研究 人员还构建了 Neoculin与甜味受体——T1R2-T1R3的对接模型，并根据研究结 果猜测酸的介入会打破Neoculin的平衡状态而转向开的状态，从而发生配体-受 体相互作用。
糖精已有100多年的食用历史了，这也可用来判定它是否会引起人体致癌的 可能。约有20份关于这个方面的调杳表明糖精与人体癌症没有直接联系。
