渭南市索马甜
钙介质中的释放，因此试验所证实的可避免脱矿物质作用是甘草甜素和氟化物附 加的作用。
2 -2 阿斯巴甜2种主要的分解途径 (1)水解生成天冬氦酰苯丙氡酸(Aap-Phc)和肀醇(McOH) (2)通过坏化作用生成《 (Asp-Phc)和甲醇 阿斯巴甜的主要分解产物图2 -4 在105?C、丨20弋和丨50尤下干燥阿斯巴甜转化成DKP的百分率 ?1 干燥状态下阿斯巴甜的稳定图2-5所示为pH、温度和时间对阿斯巴甜水溶液稳定性的综合影响。25T 时，它在PH4.3左右最为稳定，在pH3~5之间稳定性很好。图2-6和图2-7 所示为在40弋、80T及不同pH环境中该化合物的稳定性情况。在一定时间内, 通过使阿斯巴甜暴銪于高温环境中来观察其稳定性的变化情况。在图2 - 6和图
(二）提高反应平衡得率的途径山式（2-5)知反应平衡得率会受底物浓度5。影响。S。增大，平衡得率增 大。在 L/ [H20] =0.5 (mol/L)-1, S0 = lmol/L A,平衡得率提髙至 11.8%，与5。=0.丨》1101/1.时的平衡得率4.55%相比增加不明显。由于通常在羧 基或氨基末端有保护基团的氨基酸溶解度很低，即底物氨基酸浓度不可能增加很 多，因此通过该途径很难大幅度提高平衡得率。这里介绍几种使平衡向肽生成方 向移动的方法。
H2NSO,H + N (C,Hs). ~?HjNSOjH ? N (QH,),
(二）结合小分子甜味剂的活性位点
三氣蔗糖在20弋、0. 1%水溶液中的表面张力仅为71.8mN/m，由于对水的 张力很小故几乎可以忽略不计。假如碳酸饮料中的表面张力大，会引起很多泡 沫，三氣蔗糖表面张力小，可以很好地应用于碳酸饮料的制造上，且适合于高速 瓶装和罐装生产线。
(三} 4, 1、6'-三氣-6-乙酰基蔗糖酯（TGS-6-a)的分离
为了进一步确定三氣蔗糖AHS、Bs、Xs生甜团的组成，Tetsuo Suami等人利 用计算机模拟技术进行更为细致的研究。首先假设，甜味蛋白受体是一个在 /V-末端及K?附近含有L-天冬氨酸酰胺（AH和B部位）和L-脯氨酸残基的
四、甜菊双糖伴的安全毒理学分析
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
