红安县罗汉果苷
甲苯法生产糖精钠的工艺流程见图 6-11。
立体选择性催化氢解纽甜酯的脂肪酶和酯酶可以分别通过黑曲锥(Aspergillus niger)、米曲霉(AspergUlus oryzae)、南极洲假丝酵母（Candida anlarctica)、 柱状假丝酵母(Candida cylindracea)、产朊假丝酵母(Candida utiiis)、娄地靑祗 (Penicillium roqueforti) x 洋葱假第胞菌(Pscudomonas ccpacia)、少根根箱(Rhi- zopus arrhizm )、水生嗜热杆菌（Thermus aquaticus )、小麦胚芽、假单胞菌 (Pseudomonas sp. )、B 型假单胞傲(Pseudomonas sp. type B)、芽抱杆菌(Bacil- lus sp. ) x咕热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)、猪肝、马肝、兔肝以 及酿酒酵母(Saccfmwmyces ce—、等获得。一般脂肪酶首选B型假单胞菌 (Pseudomonas sp. type B)，醋酶首选从猪肝提取（表2 - 26) 0
2,3, 4, 3\ 4f-五乙酸蔗糖酯（4-PAS),中和后加人甲醉得到三苯基甲 醉，反应式见图3-16。反应制得到的三苯基甲醉可用于制备三苯基氯甲烷，以 达到循环利用的H的。
0前，已有少数几个国家批准使用新橙皮苷二氢杳耳酮。比利时将之应用在 口香糖和饮料上，但美国食品与药物管理局认为必须继续进行下面三方面毐理试 验后才考虑是否批准使用。①依照FDA的要求重新进行大鼠毒理试验，受试动物數量要比原试验 的多；②大鼠致癌性试验；③彻底的代榭试验。
4葡糖基化的研究发现，在丨3位引入2个 葡糖基后甜味特性明显改善，而在19位上引人 葡糖基则使甜味特性变差。甜菊醉双苷（结构式 如图4-6所示〉，经环糊精葡糖基转移酶催化在 13位引人葡糖基，其19位由半乳糖醋键保护，结 果发现增加1或2个葡糖基会使甜度有明显增加，
阿斯巴甜的酶法合成技术由于化学合成法专一性差，得率较低，故人们又致力于酶合成法的研究，以 期提髙得率并降低生产成本。酶合成法是使用合适的蛋由酶，将L-天冬氨酸 (氨基闭已保护或未保护）与L-苯丙氨酸甲酯缩合在一起。除此之外的操作， 与化学合成法一样。酶法合成的优点和缺点比较明显。酶法合成的优点：①转化率通常达95%以上，比化学法（一般仅70%)高很多；②且酶法只生成《-型产物，没有冷-异构体生成；③可采用外消旋化合物为底物，而在化学合成法中只能采用L型底物。
可是，由于邻二硫二苯甲酸结构上的空间障碍，与甲醇酯化需在髙压釜中进 行，反应条件较苛刻，对反应设备要求太高，只进行过中试，也没有实现工业化 生产。
将甜菊苷、可溶淀粉和浸麻芽孢杆菌MaciUus maccrans)的环糊精葡栅基 转移酶前后分别在40弋、281乙酸盐缓冲液中保持8h和10h,然后分离得到多 种转葡糖基组分（结构见图4-5),经分析知：主要转匍糖基产物中1 -la和 1 -lb是单葡糖基转化产物，1 -2a、1 -2b和1 -2c是双葡糖基转化产物， 1 -3a, l-3b、1-3c和1 -3d是三葡糖基转化产物，四葡糖基转化物的得率非 常低。
阁5-3 带嗦吗甜基因的质粒图 注：在大扬杆菌中选择性标记为Wa.在酵母中为fcu2-rf;在醉母中2-micron、ori Y和PAT153中的 oW 分别给解母和大肠杆两提供了复制功能。
