梓潼县甘露醇

梓潼县甘露醇 图5 – 5 变性嗦吗甜体外折叠至天然构塑的操作流程 (20> (25) ()0> W2-51给予一次性剂量为0. 25m^kg体重的纽甜后血浆中纽甜和脱…

梓潼县甘露醇
图5 – 5 变性嗦吗甜体外折叠至天然构塑的操作流程
(20> (25) ()0>
W2-51给予一次性剂量为0. 25m^kg体重的纽甜后血浆中纽甜和脱酯化纽甜的浓度变阁2 -52 体内纽甜的血浆浓度与剂最成正比 纽甜的最终代谢途径可以通过毒理学试验验证。放射标记试验表明大部分的 放射活性以脱酯化纽甜形式从粪便中排出。此外,用全身放射自显影照片和定萤 组织分布试验方法来检测放射性标记的纽甜在大鼠体内的放射活性分布,其结果 显示所吸收的放射活性被完全地排出体外,且在任何外周组织中没有积蓄。 在所有的检测部位中,最强的放射活性限于排泄器官(齊肠道、肝、肾和膀 腕等),更低一些的放射活性则分布在身体的其他部位。在大脑和一些其他 组织中(比如骨髄、脂肪和肌肉),放射活性的浓度要低于血浆中放射活性 的浓度。
在蛋由质印迹分析中重组嗦吗甜迁移至纯植物嗦吗甜的位置(22ku)[图 5-8 (3)],这表明在转化体中KEX2切点已被完全识别并去除了载体B2蛋白。 在高嗦吗甜分泌菌中只有一 14ku具有免疫活性的卫星带,这表明在PepA缺陷 的歯株中,其他蛋白酶对嗦吗甜非专一性水解影响很小。
阿力甜分子中的二肽,可以通过化学方法或酶法合成。其中,化学合成法应 用广泛,但化学合成过程中通常需要保护侧链,且有机溶剂和产物结合可能产生 毒性,同时,在二肽形成过程中会产生外消旋作用。相比之下,酶法合成可以通 过较少的步骤,在较低的温度下进行,并且由于酶的专一性强而不会出现产物的 外消旋现象,不需要进行侧链的保护。
早在1931年,Uridel和Uvieille就报逬了他们用猪、兔和公鸡进行的急性靡
(三)安赛蜜在食品中的稳定性
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶(GAP)基 因,其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh £co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段(-976? -1,推断+丨为翻译起始位点)作为启动子,用引物在V端加上N?d位点, 在3’端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段(+ 1006? + 1728)作为终止子,用引物在V端加上BamHI位点,在V端加上Pst丨位点, 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接,构建得质粒pGAPPTIO (图5 – 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral – Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建:从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2,在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl – Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点,构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切,并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后,与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl – KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后,与含CYH抗性 基因的丨.1比?311-5&丨1片段(-184?+974)连接,构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl – PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 – 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到,用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域(+4?+356)和 3’区域(+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段,这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll – Bgl H片段,从 PURA3的1端分离得BglD – Notl片段,两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI – Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间,构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl – PstI片段 插至pURALll的1^11和?8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。
二肽甜味剂对/V-端结构有严格的要求,C-端却是经常可以变化的。苯丙 氨酸可在环上被取代,如可用L-蛋氨酸或L-酪氨酸替换苯丙氨酸,但这样会 损失一部分甜味。除了正位的一种-OMe衍生物外,用高级同系物替代酯基团 虽仍有甜味,但甜味随分子质谊的增加而减弱。表2-40总结了这方面早期的研 究情况。表 2-40早期有关阿斯巴甜化学结构的改进研究注:①所给数佰是相对于蔗糖甜度的倍数,下同。
八、嗦吗甜的安全毒理学分析

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作者: 中国甜味剂网

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