固镇县甘草甜素

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固镇县甘草甜素

固镇县甘草甜素

(-)L41基因的改造
1.底物浓度和反应时间对产物的影响
一、甘草甜素的化学结构
虽然Vilsmeier试剂选择性很好,但由于反应温度和酸度高,控制不当舄炭 化和水解,而且反应过程中所产生的S02、HC1气体腐蚀性较大,需对其进行特 別处理。而使用三苯基膦_0(:14进行氣化,反应条件温和。具体方法是,将 6-PAS溶于吡淀后冷却至(TC,在OtT分别加入三苯基膦和CC14,逐步升温至 70^,恒温反应3h。加人甲醇终止反应,真空浓缩至干后加入丙酮,去除不洛 物后浓缩,最后加乙醚结晶,经过滤、重结晶得到浅黄晶体产物。三苯基膦与 6-PAS的摩尔比分别为7:1、6:1、5:1、4:1,与CC14的摩尔比均为2: 1,结果 如图3-25所示。从曲线趋向看,三苯基膦过量越多,越利于TOSPA生成,但 从经济角度出发,考虑到三苯基膦过貴所增加的生产成本,控制其配比为6:1, 此条件下得率为51.8%。图3-24反位温度和时间 对氣化得韦的影响图3-25三笨基膦与ca4摩尔比 对TOSPA得率的影响
一、阿力甜的化学结构与甜味特性
果浆中的仙茅蛋白不能用水抽提,因此经反复水洗可去除大萤水溶性物质, 然后可以用O.5rnol/L NaCI提取,这样就能明显提高仙茅蛋白的纯化倍数。 0.5mOI/LNaCl提取的提取液无色有甜味,然后经硫酸铵分级,再经CM-Sepha- _柱分离,NaCI线性洗脱后主要成分对应一个尖峰,该峰组分有甜味。加硫 酸铵至约饱和度的80%,得到的沉淀在lOrmnol/L磷酸缓冲溶液中溶解,溶液进 行Sepha(丨exG-100柱凝胶过滤纯化。这样从30g果浆(湿取)可以得到5mg纯 仙茅蛋白(表5-19),得到仙茅蛋白纯度很高,不溶于去离子水,溶于盐溶液 中,等电点7.1。
上述揭示的有关二肽化合物结构-甜度的关系理论为设计、探索新的二肽甜 味剂提供定性指导。根据这些理论,人们制备了数百种相对甜度在0~5_倍 之间的二肽同型物。目前有两种定量方法用来分析二肽甜味剂对结构方面的要 求,第一种就是经典的结构-甜度分析法(QSAR分析法),它能够分析二肽化 合物物理性质与甜度的关系;第二种是构象分析法,它通过数宇计算并借助 NMP来分析确定二肽甜味剂对最佳构象的要求。
3-0H/2-0、2-0H/3'-0 和 3-0H/3f-0,由于 AHS、Bs、Xs =角形生甜团 不合适的逆时针方向排列而可以不予考虑。此外,再根据甜味三角理论中八^和 8!?部位间严格的距离限制(0.25?0.40rm0,由1 - OH/3 - 0 (0. 56nm)组成 的AHS/BS对也可以被排除在外,这样就仅剩下3f - OH/2 - 0和2 - OH/3 - 0两 组有可能成为三氧蔗糖AH/B部位的最终候选者。

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