凯里市低聚木糖
三、利用呋喃果糖酶改性甜菊双糖苷
叶中提取出6. 5%的甜菊苷。由此可见，提取法经济效益很差，因此许多研究人 员都在致力于通过化学途径使甜菊苷转化成甜菊双糖苷A的研究。
尔比，反应混合物的熔点都在60T以下。复配有机溶剂的加人能保证该酶反应 在37^的均相中进行有效的反应。图2 -67 N-苄氧羰基-L-天冬氨酸乙酯和D -丙氨酰胺 按不同比例混合对反应混合物熔点的影响 注：12%的水.9%的DMSO和18%的MEA为辅助因子。
Brazzein具有高度的热稳定性，目前所获得的NMR结构淸楚显示了这一分 子特性的结构基础。Bra^dn具有4对二硫键，Kohmimi M等以嗜热菌蛋白酶酶 解法结合质谱法测定Brazzein的4个二硫键分别位于蛋白分子内Cy?4 -Cys52、 Cysl6 - Cy?37、Cys22 - Cys47、Cys26 - Cyre49 区域，其交联作用使 Brazzein 整个 分子紧密折狰，如图5-22所示。二硫键Cys22 - Cys47和Cys26 - Cys49将a螺 旋固定于芦折香的链11 (strand D )(残基44?50), 二硫键Cysl6 - Cys37将 310锞旋固定于折盎的链HI (strand ID)(残基34~39),分子的N端和C端也 通过二硫键Cys4-Cys52相交联^正是通过这种二硫键的交联作用，使Brazzein 整个分子紧密折魯成一牢固的空间结构，从而产生优异的耐热性能o
其罝换过程可简单表示为：
由实验数据得知，在奇异果素二聚体中，His29比His59更外露于分子外。 这一结果暗示，HiCQ有可能在奇异果素的味道修饰作用中扮演主要角色。因 此，他们研究了组氨酸残基周围的带电区域，这些K域有可能适合于与甜味受 体结合并产生味道修饰作用。尤其值得注意的是，许多带电残基（Arg27、 Asp28、Arg54、Glu56、Asp 166 N Argl71、Argl72、Aspl77、Lysl78 和 Glu 183)都在His29附近。这些观察结果将为证明T1R2 -T1 R3受体的带负电 荷空穴和蛋白的正电荷K域之间的静电相互作用提供了一个很好的依据。对 His59做类似的分析时，他们也发现了一个比较小的带电K域（Arg54、Lys55、 Glu56、Asp58、Asp60、Arg61和LyS186)在奇异果素二聚体中，撕基位于蛋 白的边缘，属于外餌区域，糖基与蛋白质主体之间也没有形成重要的相互作 用。与另外一种糖蛋白——Neoculin相似的是，奇异果素的糖基部分并不参与 味道修饰作用。
明石等人用含有甜菊苷和双糖苷的提取物喂养大鼠3周.没布发现它有任何抗 生育活性，这一结果与Planas和Kue的发现相矛质。Wanas和Kue用甜叶菊提取 物喂养大鼠2个月，发现它有明显的避孕作用。我们认为这之间的矛盾是由于他们 所用的原料不同所引起的，因为明石等人所用的原料仅含二萜苷成分，而Planas 等人使用的是甜菊叶、茎干燥粉的热水浓缩物。叶子中含有的成分较多，其中有些 成分如黄酮类化合物，包括5，7，4'-三羟基黄酮是具有抗生育活性的。
由于原料邻甲基苯胺来源的限制，原料成本较高，因而该法不适合于工业化
(三）蛋白质的生甜团早期研究小分子甜味剂形态而构建的活性位点模型仍可用于解释蛋内质的相 互作用，条件是蛋白质表面具有在化学结构上与小分子甜味剂相似的，可以伸入 活性位点的突出的结构特征，即“甜味指”（sweet fmgers)。因此，早期许多对 甜味蛋白的研究都集中于寻找蛋白质中可能存在的甜味指。
Baek等以还原淀粉为葡糖基供体进行转葡糖基反应，认为转葡糖基反应分2 步进行：首先由淀粉合成环糊精，然后从环糊精转移葡糖基至受体物质。推测挤 压膨胀淀粉的转葡糖基反应方式与此相似。
