寿光市甘草甜素
(一)质粒构建
本研究采用酯交换反应，以醇钠作为催化剂。具体操作方法是，用lOOmL 甲醇溶解15gT0SPA，加入自制的甲醉钠至PH9为止，搅拌室温下反应3~6h。 与处理过的强酸型阳离子树脂一起搅拌以中和 溶液，30min后过滤除去树脂，用少量甲醉冲 洗。合并滤液和洗液，加人活性炭搅拌20min，
(4)乙酰乙跣胺-氟硫酰氟法。
要使表达系统的表达水平较髙，则必须选择一强启动子。以Escherkhia coli lacZ为报告基因，发现C. ulULs的GAP启动子比C. utilis的PGK启动子的 效率高几倍。W此用的部分GAP基因（TDH3 )作为探针从
选择以滴入的方式往环化剂溶液中添加三氧化硫溶液；三氧化硫为氨蓰磺酸物 质的量的5倍，环化反应温度控制在-25?30%之间，环化时间选用0.5h;水解反应 温度为-丨5尤，水解时间为丨.5h。选用上述优化条件，安赛蜜收率可达81.6%。
其他还有许多国家和地诸如澳大利亚、加拿大、徳国、新西兰、西班 牙、比利时、墨西哥、以色列、西非、丹麦、瑞士以及其他一些欧洲国家均已批 准使用，可用于食品、饮料、医药品及化妆品上作甜味剂或风味增强剂。无疑， 嗦吗甜是一种很有发展前途的性质优良的天然食品添加剂。
(三）环原酸酯法（单基团保护法）
人们已做了大最的努力以期寻出一种安全实用的添加剂来改善嗦吗甜的甜味 特性。据报道，添加些阿拉伯半乳聚糖、己糖醛酸及其盐、酰胺或内酯等，均可 部分缩短嗦吗甜的甜味持续时间。日本有一种商品“San Sweet T-100”就是通 过添加丙氨酸、食用酸（酒石酸、柠檬酸、苹果酸和琥珀酸）及填充料等来提 髙嗦吗甜甜味特性的。这种混合物能够轻度缩短嗦吗甜甜味的最初及后续延迟时 间，而且使其可感觉的甜度差不多提高了近2倍。
尽管可以“辨别”出蔗糖8个羟基之间的微小差别，但这距有效利用这 些细微差别，以避免蔗糖在部分衍生过程中的产物复杂化还很遥远。严格控制 反应条件，包括降低温度，调节PH，使用大分子取代基团等手段，尽管可以 提高蔗糖部分衍生反应的专一性，怛各种副产物的产生仍将不可避免地给分离 工作带来巨大闲难。因此，充分考虑到这些特性，在反应路线的设计中选择某 些必要的方法，保护蔗糖分子中某些特定位置1：的羟基，而让活性较小的羟基 参加反应，最后再以轻度的反应条件将受保护位置上的基团除去，从而达到预 期的目的;>
相，1/10体积的饱和氣化钠溶液洗涤该溶液，再用等体积的溶剂（S)洗涤氣化
