三江县罗汉果苷
6 -氯-6-脱氧-D-呋喃果糖是甜的，但甜度低于蔗糖，而1，6-二氣衍 生物的甜度稍大些，相当于萠糖。这一现象很吸引人，因为其母体呋喃果糖没有 甜味。虽然在三氣蔗糖或1'，6^-二氣蔗糖（甜度为蔗糖的80倍）中的情形并 不如此，怛1，6-二氣呋喃果糖基单元被认为对三氣蔗糖的生甜团有作用。通 过对多羟基甜化合物（包括三氣蔗糖）的傅立叶红外光谱分析表明，不参与氢 键连接的游离羟基均有很陡峭的吸收吟。Kanter等人用X -衍射分析结晶状三氣 蔗糖的构象时，发现《-羟基和羟基之间存在者分子内键合（图3-51)， 而蔗糖是由于C-1 -0-C -21 司糖苷键的旋转而在2 -羟基和丨,-羟基间存在 分子内氢键（图3-38)。W此，三氣蔗糖的幣体构象不同于蔗糖。经两次同位 素复谱线局部标志本体（SIMPLE)的NMR图谱分析，在二甲基亚砜溶液中的4 种厂-氣-r-脱氧蔗糖衍生物（包括三氣蔗糖）都存在3#-0H—0-2分子
棉子糖浓度对儿reflexa的《 -半乳糖苷酶催化 转糖苷反应产物的彩
(2)去除细黹序列后的质粒pRMlI和PUM1丨的可能整合方式 注：中链奐奈林和CYHf?因的转录方向如箭头所示； 用于转化的?粒均在BglB位点断开 < 方框所示）; 限制性》切位点缩写：
嗦吗甜为天然蛋白质结构，因甜度很大，故人体摄取量很少。人类食用原果 实已有几个世纪的历史了，但都没发现任何不良反应。这些情况都表明，纯化和 浓缩的嗦吗甜应该是安全的。虽说如此，为了安全起见，1975 ~ 1985年间人们
人工合成甜味剂的缺点，集中体现在以下两点：
①甜菊苷的甜度约为蔗糖的200倍；
表4 -24 M. vinacea的a -半乳糖苷酶催化甜叶悬钩子苷
不同甜味剂在口中的甜味感觉时间不同，这个特点可用时间-强度曲线來表 示，即以其在口中不同吋间内的甜味强度来表示。如图3-11所示，三氣蔗糖的 甜味强度-时间曲线与蔗糖十分相似，甜味的刺激作用迅速，甜味持续时间与蔗 糖相似。
Claude等利用10%钯或铂碳催化剂在醇的水溶液中进行N -烷基化还原反 应。阿斯巴甜和3, 3-二甲基丁醛分别加人到甲醇的0. lmol/L的醋酸溶液中， 保持PH4.4?5.0，通人氮气一段时间，再加人碳钯催化剂并通人氢气进行还原 反应，常温、常压下反应2h。反应快结束时，通人氮气终止反应，反应结朿后 过滤去除催化剂，如有必要用lmol/L的氢氧化钠溶液把滤液调到PH5,滤液在 温度低于40七的条件K旋转蒸发去除中醉，在此过程中会有白色沉淀生成。甲 醉除去后，将剩K的混合物在室温下搅拌数小时使沉淀完全析出，经过滤、十燥 及正己烷冲洗，得到纯度大于98%的纽甜，反应产率为69%。
大多数转化体培养72h时嗦吗甜产率达到最高，72h后产率明显下降（图 5-8)。但双转化体TB2bl-44-GD5的产率在72h后仍继续增加，这是由于它 的gdhA启动子与生长期同步表达，而酯酶B2启动子在生长期结束后表达，因 此当晚表达的启动子（如次级代谢的启动子）也能被Aauwnori转录机制识别 时，将一早一晚表达的启动子结合也许就吋以延长基因的表达时间。TGDTh-4 以硫酸铵为氮源培养48h时嗦吗甜分泌量达到最髙，这是因为它采用的 A. awamori的gdhA启动子通常较早表达。
