伍家岗区果葡糖浆

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果素。首先,导入重组奇异果素基因,构建重组奇异果素的表达质粒,并在表达 质粒中插人KEX2切割位点;然后,将表达质粒导人如orrzoe,获得30 个产重组奇异果素的转化株。选择产量最高的菌株进行大规模培养,培养时间为 3d。Western印迹分析确定了培养基表面有重组奇异果岽的存在。结果还显示, 在非还原条件下,60ku处有一条宽带,301O1处仅有一条校糊的带;而在还原条 件下,60ku处的带消失,30ku处的带却变宽。这些结果与两个30ku单体在非还 原条件下形成60ku的二聚体的事实相符。重组奇异果素的产量估计为2mg/L培 养基,纯化重组奇异果素的产S娃0.8mg/L培养基,所得的单体重组奇异果素 和二聚体重组奇异果素的分子要比天然奇异果素的大。对N42、186Q突变体的 N端糖基化位点的分析结果清楚地表明,这是由于所得糖蛋白的糖链部分质里有 所不同而造成的。
从大量的安全性试验可以看出,纽甜和它的主要代谢产物(DMB-ASp- Phe)对正常机体来说是安全的,纽甜无诱变性、致畸性或致癌性,不会对生殖 或目标器官产生靡性。纽甜极低的使用最,以及其分子和主要代谢产物十分有利 的药物动力学性质,使它具有很髙的安全性。纽甜的无可观察不良反应水 平(NOAEL)对于兔子为500mg/(kg ? d),狗为800mg/( kg ? d),大鼠为 1000mg/(kg ? d),小鼠为4000mg/( kg ? d)。若假设纽甜的摄人萤约为 50mg/(kg.d)(由阿斯巴甜90%统计水平的使用萤推出),对于这几种动物而 言,纽甜的安全系数分别为1_、16000、2_和8_。而且,一些试验表 明,人体可很好地耐受达到40倍90%统计水平的摄入量。总之,大里的数据都 证明了纽甜的安全性。
虽然嗦吗甜是一种蛋白质,但它对热相当稳定。其稳定性与PH、温度、其 他可溶性物质(如氧气、酸性多糖及合成色素等)的存在与否密切相关。总的 说来,pH较低时,嗦吗甜的稳定性增大,当pH小于5. 5时,即使在100X温度 下加热数小时其甜度也不减弱。因此它适用于各种典型的软饮料(PH2.8~ 3.5),产品可经巴氏杀菌甚至超高温杀菌。蔗糖与葡萄糖的存在能增大嗦吗甜 的稳定性。有些酸性多糖(如角叉胶)的存在会因相互影响而使之甜度变弱, 但明胶能增大其稳定性而不降低其甜度。当pH较髙时,嗦吗甜的热稳定性变 小,但在室温、pH为8 ~9的碱性环境中仍较稳定。嗦吗甜在PH2以下环境中 可感觉到的酸味大于甜味,这可通过中和脱盐(如通过透析作用)而恢复其甜 度。嗦吗甜在PH2. 7?6.0范围内热稳定性很好,而在PH2.8~3.0附近稳定性 最好;可用无机酸或有机酸(如盐酸、柠橡酸、苹果酸或南马酸)来调节pH。
IH2-60 在KXTC、O.Olmoi/L磷酸盐级冲液中阿力甜与阿斯巴甜稳定性的比较表2-36 高温条件下阿力甜与阿斯巴甜水溶液的半袞期 笮位:h尽管阿力甜的稳定性远高于阿斯巴甜,但随着水溶液贮存或暴露时间的延 长,仍会出现缓慢的分解作用。如阁2-61所示,水溶液中阿力甜的分解途径较 阿斯巴甜简单得多。主要的分解途径是通过冬氨酰丙氨酰胺二肽肽键的水解, 转变成天冬氨酸和丙氨酰-2, 2, 4,4-四甲基-thietane-酰胺(丙氨酰胺)。 与所有带/V-端天冬氨酸的二肽化合物一样,阿力甜会发生《-、卢-天冬氨酸 重排现象,产生/3_天冬氨酸异构体。这种分子重排的沒-阿力甜异构体,水解 转变成其母体组成化合物(如天冬氨酸和丙氨酰胺)的速率较阿力甜来得慢。 即使在水溶液中有90%阿力甜已发生分解作用,但仍未发现有环化成二酮基哌 嗪或出现丙氨酰胺键的水解作用。图2-61所示的三种主要分解化合物,在食品 中可能存在的浓度范围内没有任何异味。
乙酰乙酰胺不产生乙酰胺,因为乙酰乙酰胺不能代替巯基酶(thiolaae)、 羟基酰基-辅酶A-去氧酶和办-羟基丁酸去氧酶的天然底物。用乙酰乙酰 胺在体内进行长期试验,从未发现有乙酰胺生成。由此可以说,安赛蜜按毒理学 的最新方法检杳,根本不会产生乙酰胺,在六!^8或其他短期试验也有见到基因 中毒现象。
图2-23所示为在以乙酸乙酯为有机溶剂的二相体系中,pH和Z-A叩- PheOMe合成的相对起始速率的关系图,图中还表示了在饱和乙酸乙酯缓冲液中 的合成结果。闭合圆(?)为根据有机相中的Z-Asp-PheOMe算得的反应起 始速率;半圆(O)为根据水相中的Z-Asp-PheOMe算得的反应起始速串;虚 线(-?〇-)为根据缓冲液中的试验结果算得的反应起始速率。在该二相体系中, 在所研究的pH范围内,由于PheOMe在水相分配不好,因此根据有机相中的 Z - Asp - PheOMe算得起始合成速率比根据在饱和有机溶剂缓冲液中算得的小。 但是,当水相pH减小,PheOMe对水相亲和力增大,使在饱和缓冲液和在二相 体系中的反应速率差值减小。因此,二相体系中反应最佳pH应在酸性范围。
糖精(=J前仍主要应用在软饮料。美国约有60%的是用在饮料上的,有20% 的是用在口香糖、果冻等其他食品,还有20%的用在餐桌甜味剂上。在我国, 糖精可以用于酱菜类、复合调味料、蜜饯、配料酒、雪糕、冰淇淋、冰棍、糕 点、饼干和面包,最大用量为0.15g/kg;糖精汁、果汁(味)型饮料按稀释倍 数的80%加人;婴幼儿食品不得使用糖精。果酒、露酒、黄酒、啤酒、白酒中 禁止使用糖精。肉类、水产类、水果蔬菜类罐头中禁止使用糖精。用于瓜子时最 大用量为1.2g/kg;用于话梅、陈皮类为5.0g/kg,可与规定的其他甜味剂混合 使用。
糖精和甜蜜素是2种最古老的人工合成甜味剂,甜味特性较差,带有明显的 苦后味,且食用安全性问题一直没有明确答案,但因价格低廉而被广泛使用。
安赛蜜是由异氰酸氟磺酰(或异瓴酸氯磺酰)与各种活性亚甲基化合物 (包括炔、酮、二酮、卢-酮酸和酮酯等)加成而成。其中由叔丁基 乙酰乙酸酯与异瓴酸氟磺酰的加成反应是唯一的具有实际用途的反应。这两 种物质反应形成的中间产物a- (/V-氟磺氨皋中酰基)-乙酰乙酸叔丁基 醋即使在室温下也很不稳定,会释放出0)2气体和异丁烯,转变成VV-氟磺 乙酰乙酸胺。

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