永顺县异麦芽酮糖

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永顺县异麦芽酮糖

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(三)邻甲基苯胺法
起初在对小鼠/人体嵌合体的研究中,这些作者发现受体对lwtisole敏感的 分子基础只是人体T1R3原体的TM区域内的一些残基而已。用丙氨酸替换人 体T1R3 TM K域的残基,结果表明,有4个关键残基是受体对lacUsole产生敏 感性所必需的。人体T1R3 TM区域的分子建模和lactisole与假设的结合口袋的 自动对接研究证实了这一抑制剂与含有四个关键残基的跨膜域内的结合口袋是 对接的。
和蔗糖与糖精相比,二氢查耳酮的甜味来得太慢,消失得也慢,后味绵长, 有时带有类似甘草甜素和薄荷醇之类的苦后味,因此,它的甜味特性不太好。改 进的办法有两种:一种是对其分子结构进行改性;另一种方法是添加些味觉改良 剂或填充剂。据研究,改性分子丝氨酸,二氢查耳酮的甜味持续时间明显缩短, 而甜度基本不变[为蔗糖的(400 ±30)倍]。添加些办-葡萄糖酸内酯、氨基 酸和核苷酸也能缩短二氢查耳酮的甜味持续时间,提高其甜味质量。
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列,构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列,使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间,给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件,然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上,用农杆菌LBA4404转化烟草,获得卡那痗素抗性转 基因植株,经过PCR及southern分析,证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因,证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下,spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白,经SDS-PAGE分析,初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
X疏水基团的引入同时也成功地解决了与甜味相伴的手性反常问题。因为 AH、B甜味理论不能解释这样一个事实:大部分D-氨基酸是甜的,但它的 L-对映体却不甜;而糖的D、L-对映体则都是甜的。AH、B. X甜味三角理论 认为,甜味蛋白受体的三个结合基团(一NH/、一0H、一R)是呈顺时针方向 排列的,因此甜味分子中的AH、B、X (如果有的话)生甜团只有呈顺时针方 向排列时才能和同样以顺时针方向排列的甜受体发生键联,从而产生甜味刺激, 如图1 -12所示。
三、色氨酸衍生物
Kohimira等通过固相合成法,分别人工合成莫奈林的A链、B链,然后将二 者组装成有甜味活性的莫奈林,其甜度是蔗糖的4000倍。同时,在不改变莫奈 林的天然构象的条件下,对A链和B链上具有竣基的氨基酸残基进行替换,合 成了一些奐奈林类似物,与人工合成的莫奈林的甜度相比较,对莫奈林的功能进 行了一系列的研究。结果发现:[Atm^GlnWAs,] - [ ASN^Gln ^0]-莫奈 林、[AsnW9Gln _]-莫奈林的甜度分别是蔗糖的550倍、4000倍。这说明:莫奈 林A链上第22、26位的Asp和第25位的Glu均不参与甜味受体的结合,但被替换 后能造成甜度的下降。[AsnAUS]-、[Asn^], [Gln^25] -、[ Asn"26 ]-莫奈林的甜 度分別是蔗糖的7500倍、750倍、2500倍和5500倍。
通过研究发现核糖体L41蛋白中的第56位氨基酸决定了酵母对CYH的敏感 性或抗性。56位氨基酸为谷氨酰胺时该蛋白为抗性蛋白,56位氨基酸是脯氨酸 时为敏感型蛋由。这也在CYH抗性酵母Candida mallosa、Kluyveromyces lactis和 Schwanninomyces cerevisiae 的 L41 蛋白得到了证实。对于 CYH 敏感型 Saccharomy- ces cerevisiae^将其L41蛋白第56位氨基酸的密码子用谷氨酰胺的密码子替换后, 细胞就具冇了 CYH抗性。
3.三苯基膦氧化物与氣化亚砜
通过比较发现,仙茅蛋白和其他6种甜蛋白和变味蛋白间的序列或结构没 有相似性,但它和雪花莲的植物凝血素(GNA)的41%完全一致,65%同源 (homology) 0 GNA是连接有甘露糖的植物凝血素。Hestei?等认为基于GNA和

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