浏阳市结晶果糖
中数日。收集，水洗，再用lOOOmL水进行重结晶，干燥后可得晶体206g (熔点 150g),得率约82%。若再用甲醇重结晶一次，可得晶体199g (熔点 172-174*00为了最大限度地提髙纯度，最好再用甲醇敢结晶一次。
(五）Maumee合成法
(一）甜菊苷的提取与精制用水提取通常选用干甜菊叶为原料采用连续提取法。欧洲一篇专利认为在 90 ~110弋之间对甜叶菊叶子进行预热处理可去除一些不受欢迎的甜味杂质，同 时还指出这过程最好在空气流、惰性气体或水蒸气中进行。还有一种去除甜味杂 质的方法是在25 ~59t的水中或丨0T以下的乙酸乙酯、二皤烷、二氣化烷、四 氢呋喃或1, 2-二氣乙烷类有机溶剂中提取。有人认为往浸出液中添加些正磷 酸盐、氢氧化钡或硫酸钡等，有利于下一道过滤工序的顺利进行。虽然日本 Stevia公司认为在100弋热水中提取也可去除甜味杂质，但他们没有说明如何从 残余的叶子中提取出残留的双萜苷。
图3-38蔗糖的结构、构象及分子内氢键
1.生甜团的分子识别早先在考虑Kier-Shallenbei?模型的尺寸范围和蔗糖的分子结构后，人们认 为蔗糖分子内有两种可能的三角形生甜团系统：即厂-OH (AH)、2-0 (B)、 4-H (X)和 3,-OH (AH)、2-0 (B)、4-H (X),它们均是以顺时针方向排列的。怛这种安排 只能证明丨? - OH/2 - 0和3# - 0H/2 - 0在充当蔗 糖生甜闭中AH、B基本单元上的正确性，却不能 说明为什么蔗糖C-l'、C-4'、C-6,位上的羟基 被氣原子取代后均能使甜度显著增加。
被澄清的溶液通过过滤和浓缩达到在真空里起 泡状态，用乙酸乙酯结晶，经过滤、重结晶及 千燥得到白色微透明的针状晶体，为4，1'，
过在60弋保持lOmin，然后在4t、pH4.5条件下保持lh,可得接近单一组分的 莫奈林（经SDS - PAGE测定）。通过离子交换柱可进一步纯化，得率约为 100mg/10g湿酵母（700mg可溶蛋白〉。提纯得到的萸奈林与天然莫奈林甜度一 样，阈值丨网，通过CD光谱分析比较重组莫奈林和天然莫奈林的二级结构单 元，因此可以预料两者必然有相同的三级结构。
2.非均匀酶催化反应体系的产物分离
注：①p-NP是对硝基笨-a-D-半乳糖苷，此处酶沽力以p-NP为底物进行昶量；
