习水县低聚半乳糖
图3 - 46丨、6^-二氣蔗糖和1'-氣蔗糖衍生物的合成
/ / 3 CH=C CH=C
(7)贫肽酶（Aminopeptidase) 也曾用来合成阿斯巴甜。
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
折吞复性试验表明：嗦吗甜不仅还原变性不容易，折叠复性也很闲难。在折 祛过程中，变性蛋白质的疏水作用和16个巯基间形成的不规则二硫键使大部分 变性蛋自发生凝聚，因此植物嗦吗甜折奋必须在极低浓度并且可控的条件下缓慢 进行。但即使天然嗦吗甜初始浓度为2(Vg/mL，最后总得率也只有约1% (O^jtg/mL),仅能被WA或高度浓缩后进行品尝试验才能测定。鉴于这些试验 成效小，因此需要寻求低成本且更髙效地从变性酵母嗦吗甜中得到天然结构的 方法。
4-?人5溶于丨00111丨.甲基异丁基酮，加热至50弋，再加人3mL叔丁胺，反应 4~6h,浓缩后加庚烷冷却结晶，过滤、干燥得到白色晶体c图3 -20所示 为4 - PAS在叔丁胺催化下得率与反应时间的关系，可见此条件下反应5. 5h
注：_ R所栺麥見本幸第一节图4-丨；G表承薷苟蟾基，C?1表示半乳糖I,下
四、三卤代苯甲酰胺
图4 - 34 蔗糖浓度对S. mulans依附作用的影响 一?一S. muian^P 15 一 -A- - S. miiiam5608 - -Q- - S. miilanjl89S —O一S. mulans ZAHT —A一5. mutans SB25 - -5. mutans SL - 1 -? ? - 5. muions NS - XIII
