薛城区甘草甜素
在设计三氧蔗糖的制备过程中，首先要选定一个蔗糖C-6位羟基被保护的 反应中间物，该中间物要求位于蔗糖C-4、1\ 6,位上的羟基可以被选择性氣 化，而其他位置上的羟基则不是很活泼。如前所述，最常用的保护法包括醚类、 缩醛（酮）类和酯类3类。单独保护蔗糖C-6位上伯羟基，最适用的方法是酯 类保护法，因为它兼具引人方便、在所葙反应条件下稳定以及易于除去等优点。 在酰化反应中，能使生成的蔗糖酯对氣化试剂稳定、最后易于水解除去的任何酰 化试剂都可以使用，通常选择相应酸的活泼衍生物作为酰化试剂，其中最常用的 是酰基酐或酰基卤。对蔗糖来说，形成乙酸酯或其他羧酸酯娃最有效的保护醇羟
甜叶菊(Stevia rebaudiana)系菊科多年生草本植物，一年生植株，髙lm左右, 主莲分枝性极强，叶对生，倒卵形至宽披针形，上半部边缘具粗锯齿，味极甜。
A、B两种分子的结构总特征很相似。新橙皮苷二氢查耳酮分子整体呈“J” 字母形状，办-新橙皮糖基位于“r字母的弯曲部位，橙皮素二氢查耳酮的糖 苷配基位于“厂字母的直线部位。一些早期的研究认为二氢查耳酮的“活性” 构象（如带有甜味的）是：糖苷配基呈弯曲或扭曲状，两个芳族环的平面大约 呈90°。假如上述固体状态的构象分析结果可引申至液体状态下的分子构象，那 就说明这些早期的分析结果不对。
四、利用环糊精葡糖基转移酶改性甜菊苷
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶（GAP)基 因，其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh ￡co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段（-976? -1，推断+丨为翻译起始位点）作为启动子，用引物在V端加上N?d位点， 在3'端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段（+ 1006? + 1728)作为终止子，用引物在V端加上BamHI位点，在V端加上Pst丨位点， 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接，构建得质粒pGAPPTIO (图5 - 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral - Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建：从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2，在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl - Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点，构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切，并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后，与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl - KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后，与含CYH抗性 基因的丨.1比？311-5&丨1片段（-184?+974)连接，构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl - PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 - 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到，用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域（+4?+356)和 3'区域（+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段，这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll - Bgl H片段，从 PURA3的1端分离得BglD - Notl片段，两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI - Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间，构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl - PstI片段 插至pURALll的1^11和？8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。
7；而nie/似的果实重10g左右，内分三部分，每一部分都含有一个大而黑的 种子，种子外面包绕层多糖类黏液，顶端有一层假种皮。假种皮上的白色肉状组 织内含有的甜的蛋白质成分，就是Thuamatin (嗦吗甜），商品名称为Talin。
此法美国Abbott Laboratories对此做过研究。反应路线短，原料易得，但反 应条件苛刻，且需昂贵的钌催化剂。
(二}蔗糖3个伯羟基的去保护作用
浓度/( g/100m Lflm')
