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由于莫奈林的A链N端与B链C端非常靠近，因此研究人员利用基因工程 技术生产共价的连接单链莫奈林。单链贷奈林有两种类型：SCM和MNE1。SCM 是通过直接把B链C端的Ghi50连接到A链N端的Argl而得，它由94个氨基 酸残基组成。MNE丨则是通过Gly-Phe 二肽连接B链和A链而得，由96个氨基 酸残基组成。利用这些合成的基因，研究人员已经实现在不同的宿主细胞（大 肠杆菌、酵母等）中表达和生产奠奈林。
表2 -70 各种构象布居数的计算值和实验值
甘草是一种豆科多年生药用植物，欧亚各地均有分布。自古以来，我国就将 它广泛应用在医药和食品加工上。然而，从甘草中提取甘草甜素（Glycyrrhizin， 简称甘草甜，即甘草酸）则是近儿十年的事，美闰、日本及俄罗斯在这方面做 了大童的研究。
这意味着曲线没有平稳区域。因此，有序不可逆历程（图1-26机理3) 似乎最能解释心物学研究得到的各种数据。主观强度（汾）与浓度关系曲线具有 伸长的最大强度平稳区域（图1-27)，它证实上面提出的这个结论的正确性， 这条曲线与机理2有些出入。
毛上。从猴、牛、狗或鼠等动物的味莆部位均可分离出与甜味剂相结合的蛋白分子 复合体，结合常数-与甜度有对应关系。分析表明，牛舌甜受体是由糖蛋白组 成，相对分子质量15_，p/为9.丨，己糖含量少于10%，氨基酸分析结果见 表1-3。一般含亲水氨基酸大于45%的为表蛋白，故甜受体属于碱性膜表蛋白 体^目前世界上已有数家实验室在从事分离味受体的研究工作，但所分离出来的 蛋白是否与原蛋白相一致，仍有人表示怀疑。牛舌甜受体蛋白的氨基酸组成
C-2上氧代对甜味具有很显著的影响，例如2，6，6'-四氣甘寐蔗糖 非常苦，苦味儿乎与奎宁差不多。用甲烷磺酰氣和二甲基甲酰胺先在-20尤下对 蔗糖处理2h，再在70T下处理10h,可有选择性地在C-6和C-6'上氣化，产 率在50%左右。在二甲基甲酰胺中，201下，用2，2-二甲氧基丙烷和对甲基 苯磺酸对其进行缩醛化作用，处理4h,然后在嘧啶中川醏酸酐使其乙酰化，除 去环乙缩醛，生成c-r和C-2位未被保护的蔗糖衍生物。用磺酰氣和氣化锂 将其氣化，脱脂后生成苦味的2，6，厂，6、四氣忡露蔗糖。
利用从Af vinacea ATCC 20034中分离出的a -半乳糖苷酶，在上述三种有机 溶剂中将TCR水解为6-氣半乳糖和三氣蔗糖的反应过程，如图3-37所示。虽 然在甲基异丁基酮中，a-半乳糖苷酶水解TCR的反应速率达到了水相反应的 90% ,怛在每种溶剂中起始反应速率和最终产物浓度都比在水溶液中低。低反应 速率是由于在溶剂系统中，a-半乳糖苷酶有更高的A：?,而非一个更低的A：#。 因此在有机溶剂中，要获得和水相反应相似的反应速率，只能通过高底物浓度来 实现，但酶的活力因溶剂影响而快速降低。在所测试的溶剂中，酶的半衰期都不 超过3d。当TCR的水解度超过60%时，反应速率明显降低，因此要获得超过 80%的水解度就显得非常困难，必须使用很高的酶浓度并大大延长保温时间 (数天）。目前为止，还没有一种《-半乳糖苷酶能达到90%以上的水解度。
本研究选用乙酸酐和蔗糖在吡啶溶液中低温下进行单酯化反应，以实现对蔗 糖C-6位羟基的单基团保护。研究发现，当蔗糖用最小世的吡啶（蔗糖：口比
