潮安区麦芽糖
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
糖精的安全毒理学分析
关于二氢丧耳酮的甜度，人们早有报迫，（;imdagni等人的研究结果见表 4-18，在或靠近阈值浓度时，新橙皮苷二氢查耳酮（D)的甜度是蔗糖的1800 倍。随着浓度的增加，D相对于蔗糖的甜度下降，当蔗糖浓度为5%时，丨丨的甜 度大约只有蔗糖的250倍。柚苷二氢查珲酮（I)和HDG (111)也同样有类似 的甜度下降趋势，但HDG下降得要慢一些。二氢查]]：酮甜度与浓度关系可用近 似式S = A：C°來表示，其中S为蔗糖浓度，C为与蔗糖甜度相等时的二氢查耳酮 浓度，A：和o为常数3当1、II和EI的尺分别为532、1703和456时，o值分別 为 0.639、0.644 和 0.734。
研究还表明，三氣蔗糖在狗、大鼠、小鼠、兔子和人体体内的代谢途径相 似。上述动物试验结果也适用于人。临床研究也确认三氯蔗糖的安全性。例如有 一个试验共有77个愿受试者参加，日摄入量达0.5g，在机体活动机能、生物 化学和血液学等方面均未发现任何变化。
三、甘茶甜素
(2)质子化状态下的结构
(六）甜菊苷对血糖值的影响
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~O- S. muians ZAHT - -A- - 5. muians SB25 - -O- - 5. muuws SL - 1 -? -B- ? - S. mutans NS - XIII
②峰单位以mg三氯蔗糖/ ? h)表示。
