兴山县索马甜

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Neoculin与甘餺醇结合植物凝集素的一级和三级结构高度的相似性表明,两 者在进化上有着密切的关系。但是,Neoculin却没有凝集素活性,雪花莲植物凝 集素不能引起甜味,Neoculin的生理学作用至今仍未弄淸楚。Neoculin的晶体结 构表明,其之所以不具备凝集素活性娃因为在与植物凝集素的甘露糖连接位点相 关的区域上的氨基酸被取代。这种取代造成的结果是,Neoculin取代残基的侧链 和甘露糖分子之间产生了空间竞争,从而导致凝集素活性的丧失,而这些区域的 主链部分则仍保持原有构象。这就意味着,对Neoculin中某些氨基酸的取代可以 使Neoculin保留植物凝集素的活性。另外,有些甜味蛋白和一些不具甜味性质的 蛋白质结构也存在相似的现象,如莫奈林和一些蛋白酶抑制剂等。这表明,这些 蛋白质的甜味或味道修饰作用是在进化过程中偶然获得的。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸(甲硫氨酸)[图5-24 (2)], 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸,经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化,因此用快速定点突变将核酸酶基因(SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸(正亮氨酸)对核酸酶活性没有影 响,SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点,这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因(SW基 因)插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间,得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生,蛋白质在lac启动子的控制下生产。
当2,4,6-三溴苯甲酰胺的C-3位被羧烷 C1 NHz 基或竣烷氧基取代后,所生成的化合物具有很高图6-29 3- (4-氣氨茴基)
纽甜酯和酶的混合物加人到含有5%?50%乙腈(或DMSO和DMF〉的
氢-1,2,3-噁喷嗪-4-酮-2, 2-二氧化物粗品。反应方程式为:
值得注意的是,三氣蔗糖-3,, 4#-环氧化物是不甜的。由于环氧化作用所 导致的呋喃环构象形变,并不足以抵消三氣蔗糖和受体模型之间的色散作用,这 就意味着果糖基的3#-oVl是构成甜味AHs/BJ、t的必需部分。同样,2,r-二 氧-2,1'-二脱氧-甘餌蔗糖也不甜,说明葡糖基的2-OH也是蔗糖衍生物甜 味所必脔的。
derived,Charles River CD白鼠);③最敏感的性别——雄性;④最敏感的暴露 期——第二代。
以达到甜味提供f方便。诸如往糖楮中添加0. 33%嗦吗甜的混合甜味剂味觉特 性很好,而这种添加量水平的嗦吗甜还不足以提供明显的甜味,但它带有持久微 弱的甜味正好掩盖了糖精的苦后味。
八、嗦吗甜的安全毒理学分析

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