奉新县果葡糖浆
这些关于二肽同型物的早期研究表明，甜二肽化合物在结构上有着严格的要 求，以确保它能与甜受体发生作用。下面的阐述将对这些要求在经验上做更详细 的论证和改进。
制备三氣蔗糖的核心在于对活泼的C - 6位羟基进行保护，使之不被氣化。 所谓单基闭保护法，就是只对蔗糖分子8个游离羟基中的C-6位羟基进行专一 保护，然后直接进行选择性氛化。该方法可以使反应过程大幅度简化，但一般需 要髙效的色谱分离操作。
最近，研究人员还发现了一种NAS的同种异型物一NAS-2。仙茅蛋白2 的cDNA已克隆，其核苷酸序列也被测定。尽管，仙茅蛋白2的推测氨基酸序列 与NAS的相同，研究人员发现两者的核苷酸仍存在一个不同之处。Maiko Suzuki 等尝试了在￡：.co/i中表达重组仙茅蛋白1 (过去被认为是Cimnilin)和仙茅蛋白 2。仙茅蛋白1和仙茅蛋白2分别在E. coli中表达，然后用氧化重折叠方法重新 组合，从而获得仙茅蛋白的二聚体。可是，无论是仙茅蛋白1的同型二聚体 (仙茅蛋白丨-1)还是CurcuUd的同型二聚体（仙茅蛋白2-2),都未能引起 甜味，也未能起味道修饰作用。
以上四种合成方法中，方法（丨）和（2)均存在原料来源闲难，反应条件 苛刻等缺点，不利于工业化生产。方法（丨）和（4)所窬原料含氟化物，腐蚀 性强，且环境污染严重。方法（3)以工业上易得的氨基磺酸、双乙烯酮、三乙 胺、三氧化硫为原料，反应条件温和，产品收率高、纯度高，是一种较理想的工 业化生产方法，以下是对该法的详细介绍。
二?、鸡蛋清溶菌酶
4-?人5溶于丨00111丨.甲基异丁基酮，加热至50弋，再加人3mL叔丁胺，反应 4~6h,浓缩后加庚烷冷却结晶，过滤、干燥得到白色晶体c图3 -20所示 为4 - PAS在叔丁胺催化下得率与反应时间的关系，可见此条件下反应5. 5h
现在，人们正努力研究以期分离出能引起上述反应的专一微生物。已发现很 多细菌具有分-葡糖犴酸酶的活性，能将甘草甜素水解成甘草亭酸。只有两种细 菌可将3 -脱氧-18 -卢-甘草亭酸还原成甘草亭酸或3 -表-18 -甘草亭酸。 从人的新鲜粪便中分离出的瘤符球歯属(Riimirwcoccus)具有水解甘草甜素生成 18 -P -甘草亭酸的功能，另外可将3 -脱氢-18 -甘草亭酸还原成对映体 3-表-18-0-甘草亭酸的梭状芽孢杆菌(Clostridium)也是从人刚排出的粪便 中分离出来的。这两种细菌的混合体能将甘草亭酸异构成3 -表-18 -办-甘草 亭酸，反过来也如此。这一过程可能是通过氧化中间体3-脱氢-18-/3-甘草 亭酸而进行的。甘草甜素转化成3-表-18-分-甘草亭酸是分几步进行的，其 中的终端异构物（isomer)是几种细菌的?种产物。所有变化可概括成：甘草甜
(2)]，居于5处的X会令二肽化合物产生苦味[如图2-86 (3)],而居于3、 4、6处的X则不会导致二肽化合物产生任何味道。
到目前为止，仍未见有成功表达具有味进修饰活性的兎组Curculin的报道。 至于Neoculin, Ken - ichiro Nakajima等人已成功在九oryzae中实现胞外生产 Neoculin0将每一个NAS和NBS基因与含有一个带有三乙酸基氨模体的KEX2切 割位点的a -淀粉酶基因融合，所形成的两种表达质粒共转化为I oryzae NS4菌
/ \ / \
