察哈尔右翼中旗乳糖醇

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如果Thaumalococus果实尚未完全成熟就被摘下，甜蛋內的进一步生成还会 持续好几天，即使果实已经完全与植物相分开，此时如果用具有放射活性的二氧 化碳（l4co2)气体来进一步熟化这种未成熟的果实，那果实中所生成的甜蛋白 也有[14c]标记。该研究淸楚表明甜蛋A嗦吗甜的生成主要是通过假种皮，这 就为遗传控制提供了一个理想的机会。遗传控制的目的在于利用另一宿主来产生 嗦吗甜，全世界有两个单位较早进行这方面的研究：一是位于大不列颠坎特伯?雷 市（Canterbury)的Kent大学，另一个是位于荷兰Vlaardingen的Unilever研究室 中的微生物与有机化学研究组。
以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针，与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照，对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明，在各转化体的表达盒没有发生重 排，各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
还有些试验报道发现了糖精的代谢产物2-氨磺酰苯甲酸及2-邻苯磺基苯 甲酸，但这些试验所用的放射元素标志水平较低，代谢物仅依靠单一的薄层色谱 (TLC)检测，作者对是否排除了色谱过程中可能形成的后生物并非很有把握。
果素。首先，导入重组奇异果素基因，构建重组奇异果素的表达质粒，并在表达 质粒中插人KEX2切割位点；然后，将表达质粒导人如orrzoe，获得30 个产重组奇异果素的转化株。选择产量最高的菌株进行大规模培养，培养时间为 3d。Western印迹分析确定了培养基表面有重组奇异果岽的存在。结果还显示， 在非还原条件下，60ku处有一条宽带，301O1处仅有一条校糊的带；而在还原条 件下，60ku处的带消失，30ku处的带却变宽。这些结果与两个30ku单体在非还 原条件下形成60ku的二聚体的事实相符。重组奇异果素的产量估计为2mg/L培 养基，纯化重组奇异果素的产S娃0.8mg/L培养基，所得的单体重组奇异果素 和二聚体重组奇异果素的分子要比天然奇异果素的大。对N42、186Q突变体的 N端糖基化位点的分析结果清楚地表明，这是由于所得糖蛋白的糖链部分质里有 所不同而造成的。
要在酵母中表达嗦吗甜，首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达，采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因，为便于操纵DNA序列，在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列，随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
(二）构象分析
第二节蔗糖衍生物的进展本书第一章巳对甜味剂理论做r详细讨论，本节在此基础上对蔗糖的化学改 性以期寻求更理想甜味衍生物的研究进展做一系统论述，首先从蔗糖的甜味理论 开始讨论。
注：?系从天然物中提取出的紫杉叶素（TaxIfoirO鼠乍糖作衍生物。