潜江市甜蜜素
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
(四）反应惰性溶剂的选择
甜味强度的定量测定甜味强度的测定目前只能通过尝味评定的方法来进行，因为尚无甜度的仪器 测定法。随着生物化学的发展，如果有可能从汚头中分离出具有活性甜味感觉的 受体蛋白来，那最终就有可能出现精确的仪器测定法。丨978年，Edwadson等人 报道了一种先进的免疫分析法，可以用来测定一系列甜味化合物与被选用抗血淸 的表观结合悄况。这个引人注目的进展有可能发展到出现一种评价甜味与化学结 构关系的客观方法。
三、阿斯巴甜的化学合成技术阿斯巴甜的生产方法有3种：化学合成法、酶合成法和基因工程法。总的说 来，已有的生产公司多采用化学合成法，酶法较少使用，至于基因工程法，仅在 理论上作了分析。
(2)乙酰乙酰胺-三氧化破法：由乙酰乙酰胺与至少两倍的三氧化硫反应 获得产品。
细致的复查。基于关键试验准确可靠，毒理试验报告可以接受，为此专门成立了 一个公众问洵局（Public Board of Inquiry，PBOI)，专门负责答复反对者的意见， 并接受所有关心者的咨询，这项工作一直持续到丨980年丨月30日为止。这期 间，美国纽特公司共花费f 2000万美元的安全评价费和数百万美元的公众咨 询费。
0前，已有少数几个国家批准使用新橙皮苷二氢杳耳酮。比利时将之应用在 口香糖和饮料上，但美国食品与药物管理局认为必须继续进行下面三方面毐理试 验后才考虑是否批准使用。①依照FDA的要求重新进行大鼠毒理试验，受试动物數量要比原试验 的多；②大鼠致癌性试验；③彻底的代榭试验。
虽然人们所进行的大萤研究，包括长达2年的慢性毒理研究均未发现甜菊苷 有任何致突变的可能，但有人发现具有代谢活性的甜菊醇是会产生突变效果的。 1985年Pezzuto等人使用经Aroclor 1254或苯巴比妥及辅酶II处理的小鼠均匀肝 脏组织中的S- 9部位作为活性系统，使用Salmonelia typhimuriurnlWHl携带 “R-因子”质粒PKM1001作为标志系统进行诱变分析。他们总结认为细胞色素 P -450传递的代谢活性与甜菊醉C - 16和C -丨7之间的一个双键有关，它能产 生至今仍未被人们所认识的诱变因子。还认为甜菊醇第13位羟基团是诱变的表 现式，因为异贝壳杉烯酸无诱变活性，且甜菊醇在丨3羟基的乙酰化产物会阻止 其诱变活性。他们还发现有代谢活性的甜菊醇在能观察到有诱变活性的浓度范围 内是很有杀菌活力的。
①合成马槟榔D的A链（Glul-Asp33)和B链的三个片段（Glul-Pro20、 Cyc21 - Gly41 和 Pro42 -Trp72)；
