武陵源区山梨糖醇

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从植物中分离得到的Brazzein有几种结构,其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸(pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外,其 余均相同,称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低,只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达,葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100,且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙,因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
无可罝疑,甜菊双糖A苷在甜味、口感、后味及稳定性等方面均比甜菊苷 优越。关于其后味的问题人们争论得较多,但大最证据证明其苦后味已减弱很 多。虽然目前甜菊双糖A苷还未商业化生产,但它作为一种主要成分存在于 Stevix和 Marumilon 50 产品中。
五、嗦吗甜的生产技术
当S -6 - a达到最大得率时,可通过DEAE -纤维素树脂除去果糖转移酶, 或通过热变性(65弋、lOmin)作用来终止反应。最后,S-6-a经高效液相色 语(固定相为Cl8柱,流动相为水)的分离提纯作用可以获得纯度大于85%的
(7)水溶性好。
当同一分子中有几个羟基时,三苯基氣甲烷、叔丁基二甲硅醚氣化物和二异 丙基硅的氣化物可优先与伯羟基反应,可达到选择性部分保护的目的,其中三苯 甲基很广泛地应用于糖、核苷和甘油酯化学中用来保护伯羟基。选用三苯基氣甲 烷与蔗糖反应时,由于三苯甲基体积较大而产生空间位阻,只能取代6、r和6' 三个伯羟基上的氢原子,生成6, \\ 6'-三苯甲基蔗糖醚。而相对比r位活泼 的4位仲羟基,因三苯甲基的分子基团过大,难以被活化而不参加反应。三苯甲 基醚通常由多元醇与近计算最的三苯基氣中烷,在吡啶溶液中室温或髙于室温反 应来制备。研究表明,如用二甲基甲酰胺代替吡啶,并使用叔胺(如/V-甲基吗 啉)或聚合胺(如2-聚乙烯吡啶)作为酸清除剂,可在较低成本的基础上提髙 产率。三苯基醚可溶于多种非极性有机溶剂中,它对碱和其他亲核试剂稳定,但 在酸性介质中不稳定。
根据甜味三角理论,A和B是空间相距0.25 -0. 40nm的带负电荷的两个原 子,其中A与带正电的质子结合成为AH。AH在整体上可以是酸,B为质子受 体,可认为是碱。一个甜味分子中的AH、B系统可和位于甜味蛋白受体上另一 个合适的AH、B系统进行氢键结合,形成双氢键复合结构。甜味分子和甜味蛋 白受体的复合反应虽然没有生成新的产物,但它却引起一个依靠神经冲动传递的 甜味刺激,两者间的复合强度决定了甜味刺激强度即甜度。
(—)Brazzein的物化性质

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