个旧市甜蜜素
(三）临床前期的安全性试验纽甜临床前期的安全性试验主要包括亚慢性、慢性和长期致癌性试验（表 2-30)。试验所选择的动物有大鼠、小鼠、狗和兔子等。在试验过程中，把纽 甜添加在动物的饲料中喂养，并且要定期调整饲料的配方和浓度以维持每日每千 克体重摄入量的稳定，而不是在饲料中添加固定百分比的纽甜。在毒性试验中用 显微镜来检查各种不同剂量范围的全部动物组织，用标准和补充指标来评价免疫 毒性、神经毒性或对行为的影响。
②持续时间的测定采用10jtmol/L仙茅进白和奇异果素。
culin 酸性亚基 (NAS)或仙茅蛋白2。相应的，原来所发现的成分仙茅蛋内单 体，则被称为NBS或仙茅蛋白丨。用蛋白质测序仪测定NAS的氨基酸序列，发 现NAS为一个含有丨13个氨基酸残基的、N端被糖基化的酸性亚基。NAS的核 苷酸序列也已被测定。推测所得的氨基酸序列表明前体NAS-1由158个氨基酸 残基组成，且包含一个信号序列的22个氨基酸和C端扩展区的23个氨基酸残 基。NAS和仙茅蛋白的氨基酸一致性高达77%。
有人对此法进行改进，采用了加压合成的工艺，当原料配比（环己胺： 氨基磺酸）为4:1,反应压力为0.2MPa,反应温度为165T,反应时间为 4h,甜蜜素的产率可高达98. 1%。该方法可以克服常压法所带来的焦结或 反应速度慢的问题；也避免了使用其他高沸点溶剂所带来的纯化产品和回收 溶剂问题，具有反应平稳、副反应少、反应时间短、产率髙等优点，有工业 化实用价值。
二肽甜味剂对/V-端结构有严格的要求，C-端却是经常可以变化的。苯丙 氨酸可在环上被取代，如可用L-蛋氨酸或L-酪氨酸替换苯丙氨酸，但这样会 损失一部分甜味。除了正位的一种-OMe衍生物外，用高级同系物替代酯基团 虽仍有甜味，但甜味随分子质谊的增加而减弱。表2-40总结了这方面早期的研 究情况。表 2-40早期有关阿斯巴甜化学结构的改进研究注：①所给数佰是相对于蔗糖甜度的倍数，下同。
三、阿力甜的化学合成技术阿力甜的化学合成可以分为三步，首先是2, 2, 4，4-四甲基-3-硫化三 亚甲基氨的合成。在冰水浴条件下，将二氣化硫缓慢加人到二异丙基甲酮中，反 应温度不超过30弋。当反应生成的HC1开始减少时，再反应30min后终止反应， HC1用真空泵抽出。这一步亚氧基硫氣的产率能达到90%以上。将得到亚氧基 硫氣溶解在四氢呋喃中与叔丁基钾四氢呋喃溶液混合，搅袢反应lh，反应结束 后，用丨mol/L的盐酸调pH至3.0，加水，同时用乙醚提取反应产物，过滤、干 燥后得到2，2, 4，4-四甲基-3-硫杂环丁酮，产率也能达到90%以上。在密 闭反应釜中让2, 2，4, 4-四中基-3-硫杂环丁酮、盐（最好是磷酸盐等弱酸 盐）及氨衍生物在100T以上的温度下进行反应，2，2，4，4-四甲基-3-硫 杂环丁酮和氨衍生物的缩合物，产率可达到90%以上。为避免高温、高酸性条 件下的副反应，此反应所用的盐，其pKa最好在1?4。第二步，反应产物2，2，
已有100多个试验结果证实了三氣蔗糖的食用安全性，没发现三氣蔗糖及其 副产物的任何不利影响。即使以很髙的剂最（丨6g/kg)喂养啮齿动物终生，也 可确认其安全、无毒性。而这个16g/kg的剂萤，相当于人体每天摄取1801碳酸 饮料所包含的三氣蔗糖数摄。
很值得一提的是二氢查邛酮是天然梢物组织中存在的类黄酮化合物的典型例 子，所不同的是它的两个(：6芳族环与（：3桥相连。虽然尚不知道上面我们所讨论 的二氢查耳酮在Q然界中是否存在，但很明显它们是柑橘黄烷酮类柚苷、新橙皮 苷和橙皮苷（后者去掉一个鼠李糖基团）的还原态开链类似物。有关天然植物 中二氢查邛酮的报^[不多，这可能是因为它们的测定比较闲难的缘故，但已知金 橘中确实存在一些C-葡萄糖基二氢查邛酮。
