大埔县木糖
采用电穿孔法，将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究，酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小，使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体（4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度），进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为：2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂，使细胞对渗透压更敏感，因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基，也不能得到CYH抗性菌落，需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后，再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
甘茶甜素（Phylloduldn)是用酶水解法由虎±1：草科（Saxifragaceae)植物八 仙花 Hydrangea macrophylla Seringe var. thundergii ( Siebold ) Makino 叶子天然存在 的糖苷中分离出来的，它在叶子中的含最高达2. 36%。围绕着Phyllodulcin的分 离纯化，已申请了数个专利方法。有一种方法是利用甲醇或乙醇提取，通过调节 1>H及用氣仿抽提法去除色素及Hydrangenol ( Phyllodulcin的非甜同型物）等杂 质，然后用一种非极性溶剂在pHIO条件下进行选择性抽提，可得到髙纯度的 Phyllodulcin 产品。
不同来源的半乳糖苷酶催化得到的转糖苷产物见表4 -23。其中K. laclis 的芦-半乳糖苷酶不对RU进行转半乳糖苷反应。环状芽孢杆菌的-半乳糖苷 酶在反应初始阶段优先将半乳糖基转移至RU的19 -羧基相连的葡糖基上，得到 以芦-1，4糖苷键连接的RGal - la,然后得到RGal - lb。RGal - la是CGTase 转糖苷的良好受体，因为其19-羧基相连的葡糖基上的C4-0H已用半乳糖基 保护。而大肠杆菌的卢-半乳糖苷酶主要将半乳糖基转移至19-羧基相连的葡糖 基上，得到以尽-丨，6糖苷键相连的RGal-2，该产物不适于用作CGTase催化 转糖苷反应的糖基受体，因糖基会优先与13-0H相连的葡糖基连接。米曲裤 {As. oryzae)和P. 的芦-半乳糖苷酶催化得到RGa丨-1、RGal - 2、
Qli.NUSDjNHjCjH,, + NaOIl~?QHnNHSOjNa+ QH..NHJ + H20 此法最早于1942年由美国Audrey和Sveda合成，此后又多次改进，生产工 艺比较成熟，我国部分厂家也采用此法生产。可以以三氣乙烯为溶剂，反应后经 分离、浓缩、萃取得到95%的甜蜜素。
Brazzein最早由Ming和Henekant于1994年分离得到，它是从非洲植物Pen- tadiplandra Brazzeana Baillon的果实中提取得到的可溶性甜蛋白，甜度是鹿糖的 500倍，后味比糖精弱。
(-)甜菊苷的甜味特性甜菊苷是甜叶菊甜味成分中最主要的一种。甜菊苷主要有三种基本形式，即 粗提取物、50%纯品、90%或更高的纯品。纯甜菊昔（纯度90%以上）是白色 粉末状产品，次纯晶（纯度50%)呈淡棕色。甜菊苛易溶于水，在空气中会迅 速吸湿，室温K的溶解度超过40%。商品级产品的十燥损失为1.5%?4.0%， 重金属含萤不超过30mg/kg。甜菊苷不溶于丙二醇或乙二醇。
_法合成的缺点：①它的投料浓度与产物浓度一般都很低，生产张度低，物料处理量大，能 耗大，酶的回收困难；②酶法尚无法独立完成阿斯巴甜合成的全过程，其甲酯化仍需用化学法， 在生产过程需兼具化学法和酶法两套工艺。
图2 -45 17mg/L纽甜和525mg/L阿斯巴甜水溶液的瞬时甜味分布(2)滞后时间、，即强度达到超过基线水平所需的时间（s):阿斯巴甜 1.3,纽甜 1.5。(3)达到最大钱度所需的时间(s):阿斯巴甜丨2.3,纽甜丨6.6。(4)最大强度持续时间(s)：阿斯巴甜6.1，纽甜2. 8(5)结束时间即强度回到基线水平所需的时间（0:阿斯巴甜80.5, 纽甜94. 8 o(6)曲线下总面积(以强度单位x时间表示）：阿斯巴甜425，纽 甜49丨。.
协同增效作用具有很大的应用价值，对研究味觉机理也很蜇要。由此可推断 认为两种甜味剂在甜受体上各有不同的作用部位，如两者彼此不影响，则各有各 的受体；如两者彼此削弱，则说明它们是竞争性占有相同的受体部位，当然削弱 作用还可能有其他非竞争性抑制因素。
TGS -6 -a与乙酸酐吡啶溶液充分反应得到TGSPA，此全酯化反应不涉及选 择性保护的问题，因此反应条件相对于蔗糖C-6位的单酯化来说要宽松得多而容 易进行。然后，通过乙酸乙酯或甲苯等有机溶剂将TGSPA从含水的体系中提取出 来，再经浓缩、结晶，最后脱除5个乙酰基，即可得到较纯的三氣蔗糖终产物。
