江汉区甜蜜素

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从植物中分离得到的Brazzein有几种结构,其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸(pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外,其 余均相同,称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低,只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达,葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100,且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙,因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
表2-39 阿力甜的16种应用范围
美国威斯藤丰大学校友会科研中心分别以0. 05%、0. 5%和5. 0%浓度的糖 精喂养雄、雌鼠各20只,其中F,代断奶后喂以代饲料持续100周。F,代从母体 怀孕期就开始接触糖精,之后哺乳、成长至终身均持续摄取糖精。在这组试验
Homandberg等人以1,4-丁二醉为有机助溶剂,用《-胰凝乳蛋白酶催化 Z-Trp和GlyNH2合成Z-TrpGlyNH2 (Z =苄基)进行试验,证实上式成立,且 结果还表明水活度的增加对增加平衡常数的作用可以忽略不计。3.水、有机溶剂二相体系法
1978年马里兰国家牙科研究所就嗦吗甜对大鼠的致龋齿特性做了专门评价,结 论是嗦吗甜不会引起牙齿龋变,但也不会抑制龋齿现象发生,即不具抗龌齿活性。
于是,他们对奇异果素做了定点突变实验。考虑到丙氨酸不会产生特殊的空 间和电子效应,他们用丙氨酸替换组氨酸-30和/或组氨酸-60。结果发现,所 得突变体和重组奇异果素的分子大小和糖链结构类似,并且每种突变体都如期地 以二聚体形式存在。有趣的是,感官测试结果显示,0.5mg/niL的H30A和H30、
四、Brazzein的应用

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