沾化区甘草甜素

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三、利用生物技术法生产Brazzein
(三)临床前期的安全性试验纽甜临床前期的安全性试验主要包括亚慢性、慢性和长期致癌性试验(表 2-30)。试验所选择的动物有大鼠、小鼠、狗和兔子等。在试验过程中,把纽 甜添加在动物的饲料中喂养,并且要定期调整饲料的配方和浓度以维持每日每千 克体重摄入量的稳定,而不是在饲料中添加固定百分比的纽甜。在毒性试验中用 显微镜来检查各种不同剂量范围的全部动物组织,用标准和补充指标来评价免疫 毒性、神经毒性或对行为的影响。
下方所示为排序后的限制性_切围。粗箭头表示阅读框的位置和方闲。方框所示为内含子区域。
3.受体蛋白活化构象受体蛋白,由于其识别部位通过离子键和氢键的相互作用,形成紧密的收缩 构象(the contracted conformation),该状态称为 R 状态(the resting state),见图 1 -18n当甜味分子与受体蛋白相互作用后,两者形成分子间氢键,或者两者之间的 空间作用力,将可能导致受体蛋白识别部位之间部分离子键和氢键的断裂,从而 使受体蛋白紧密的收缩构象发生改变,形成更为开放的展开构象(the expanded conformation),称为受体蛋白的活化状态,见图1 - 19。某些强力甜味分子存在 高度结合部位如C02、CN、铵基或胍基,能够轻易破坏受体蛋白识別部位之间 的氢键,而且其分子上的环状刚性基团,像一个分子楔,合适地楔入识别部位 (即为空间楔入),也能使识别部位间的氢键断裂,因此具有强力甜味。
Guthrie和Wauers认为,1 ’ -氣-厂-脱氧蔗糖对转化酶是稳定的,而且酸 对它的水解速度为对蔗糖的丨/10。与6’-氣衍生物一样,它比蔗糖甜20倍,但 6-氣-6 -脱氧蔗糖是苦的。易从七-新戊酸酯(hepui-pimlate,游离的 4-OH基闭)制得的4-氣-半乳糖基-蔗糖衍生物,其甜度是蔗糖的5倍(图
■,TCTh-21; O, TB2bl -44;垂直细线所示为该倍标准偏差。
图5 - 19 在非选择性培养箪培养50代后各转化体产物的SDS - PAGE图 注:箭头所指为单链莫奈林分子位
急性毒理试验是以同时包含甜菊苷和甜菊双糖苷A的提取物为原料的。含有 50%甜菊背和40%甜菊双糖苷的甜菊提取物对大鼠的f?数致死虽LD?为3.4g/kg, 对小鼠的半数致死量为17 ~42g/kg。Med?n认为用双糖A、B、C苷,甜菊醇生糖 苷和卫矛A苷口服喂养小鼠均无毒。Alcashi等人用含双糖A苷和甜菊苷的甜叶菊 水提取液喂养小鼠3个月进行亚急性毒理试验,也没有发现任何有害作用。

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