睢阳区低聚木糖

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据分析,它的分子中的於-折奋与月-弯曲的数虽较多,分别为29%和 27%,其余均为自由挠曲。然而,这些仅是理论推测的结果,并非是直接测定的 精确数值。德国柏林的Max Planck学院的研究人员用计算机计算结果表明,嗦 吗甜分子中a -螺旋占10% ,芦-折蚕和/3 -弯曲的占70%,自由挠曲占20%。 显然这些数值与上面的推测相差甚大。
—、阿斯巴甜的物化特性阿斯巴甜为无味的白色结晶性粉末,具有淸爽的甜味。它微溶于水 (1.0%, 25^),难溶于乙醉(0.26mg/100mL),不溶于油脂。阿斯巴甜是一种 二肽化合物,结构式如图2 - 1所示。分子式C,4Hl8N2 05,相对分子质量 294.31。它具有两性性质,25T时2个离解常数的负对数是3.1和7. 9,等 电点p/为5. 2,双熔点约1901和245弋。图2-丨阿斯巴甜的化学结构
不同的Candida utilis菌株电脉冲转化的效率有较大不同。将Bgl D酶切后的 PCLRE2通过电穿孔转化至ATCC9256和ATCC9226,都能得到CYH抗性菌落, 多拷贝载体DNA也串联整合至rDNA区,但转化率都不到ATCC9950的10%。 整合至ATCC9256的pCLRE2拷贝数为6~8,整合至ATCC9226的拷贝数为 5-9,整合至ATCC9950的拷贝数为10?12。
(1)以环己胺和氨基磺酸钠为原料
研究表明,甜味受体是类似于谷氨酸受体、Ca2?敏感受体、y-氨基丁酸B 型受体和信息素受体的C族G蛋A偶联受体(GPCR)。所有这些G蛋白偶联受 体不仅都有一个7-螺旋跨膜结构域(7TM),而且还有一个含典型配体活性位 点的大胞外结构域——Venus flytrap结构域(VFTD),以及一个半胱氨酸富 集域。
CH=C CH=C
Dong - Chan等用Bacillus macerans的环糊精葡糖基转移酶,以挤压膨化淀粉 为糖基供体,采用非均匀酶反应体系,对甜菊苷进行转葡糖基反应。对非均匀酶 反应体系和传统反应体系进行了比较,并确定了甜菊苷的转葡糖基的最优反应 条件。
果素。首先,导入重组奇异果素基因,构建重组奇异果素的表达质粒,并在表达 质粒中插人KEX2切割位点;然后,将表达质粒导人如orrzoe,获得30 个产重组奇异果素的转化株。选择产量最高的菌株进行大规模培养,培养时间为 3d。Western印迹分析确定了培养基表面有重组奇异果岽的存在。结果还显示, 在非还原条件下,60ku处有一条宽带,301O1处仅有一条校糊的带;而在还原条 件下,60ku处的带消失,30ku处的带却变宽。这些结果与两个30ku单体在非还 原条件下形成60ku的二聚体的事实相符。重组奇异果素的产量估计为2mg/L培 养基,纯化重组奇异果素的产S娃0.8mg/L培养基,所得的单体重组奇异果素 和二聚体重组奇异果素的分子要比天然奇异果素的大。对N42、186Q突变体的 N端糖基化位点的分析结果清楚地表明,这是由于所得糖蛋白的糖链部分质里有 所不同而造成的。
采用电穿孔法,将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究,酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小,使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体(4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度),进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为:2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂,使细胞对渗透压更敏感,因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基,也不能得到CYH抗性菌落,需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后,再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。

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