吴川市木糖醇

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吴川市木糖醇

吴川市木糖醇
(一)莫奈林的化学结构
0.636nm、B …X=0.735nm。如果以 3,-OH ( AHS) /2 - 0 (Bs)为 AH/B 对, 甜味分子的0-3,…0-2…Cl-4,距离AH…B分别为0.484nm和0.406nm,距 离太远。但是甜味分子(少=82.5°,少=丨3.8°)的0-3,…0-2…C卜4,能够 满足AH、B、X甜味三角理论(果聚糖衍生物AH…B =0.208mn、AH…X = 0.277nm、B…X = 0.555nm,塔格糖衍生物 AH …B = 0. 231nra、AH …X = 0. 437nm、B…X =0. 627nm) 0
三氣蔗糖在水溶液中有2种可能的降解途径。在低pH条件下,三氣蔗糖会缓 慢地水解成其组成单糖的衍生物,水解速度随和温度而定。在高pH条件下, 它会在碱催化下从1和6’位置上消去氣化氢分子而形成3',6^-酐。图3-5所示 为这二种可能的分解途径。当然在食品配料系统中,只可能出现酸催化分解现象。
有一段时期,人们热衷于寻找各种可供选择的天然甜味剂,奇异果素显示出 广阔的应用前景和潜在的商业化开发价值,备受人们的关注。直至后来美国成立 了 Maralin合作开发公司,在拉丁美洲的西印度群岛和巴西建立了 S. dukificnm的 大规模种植基地,培育了杂交新品种,应用新技术进行繁殖推广。他们还研制出 奇异果浓缩片剂,向美国消费者推荐在各种特殊苕养食品或菜谱中加以使用,以 降低对能量的摄入。
如图4-34所示,在有蔗糖存在下,S. 具有强烈依附于玻璃表面的趋
要批准和使用一种新的人工甜味剂,毐 性鉴定是极其重要的。人们已对安赛蜜进行 了一系列严格的毐理试验,结果表明它是一 种安全无毒的高效甜味剂。
三脱氧-半乳糖基-蔗糖(Sucralose,参见本章第一节)是最甜的蔗糖衍生 物,比蔗糖甜600?650倍。由于Sucralose具有甜味纯正、安全无毒等特性,对 抗酸水解的稳定性比蔗糖大60倍,因此英国Tate & Tyle公司选择了它作为一种 髙效新型的甜味剂加以开发,现已实现产业化规模。
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶(GAP)基 因,其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh £co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段(-976? -1,推断+丨为翻译起始位点)作为启动子,用引物在V端加上N?d位点, 在3'端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段(+ 1006? + 1728)作为终止子,用引物在V端加上BamHI位点,在V端加上Pst丨位点, 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接,构建得质粒pGAPPTIO (图5 - 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral - Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建:从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2,在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl - Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点,构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切,并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后,与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl - KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后,与含CYH抗性 基因的丨.1比?311-5&丨1片段(-184?+974)连接,构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl - PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 - 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到,用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域(+4?+356)和 3'区域(+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段,这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll - Bgl H片段,从 PURA3的1端分离得BglD - Notl片段,两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI - Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间,构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl - PstI片段 插至pURALll的1^11和?8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。

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