临澧县索马甜
Nofre等报道，以5%钯碳作为催化剂，在40T、0. 4MPa氢压下对甲醉化的 APM氢化13h，当催化剂含水量为60%，且循环使用5次后，催化效果最好。 反应结束时，氢化反应液中含NTM89. 5%、APM7. 3%、二取代APM0. 6%和二 取代脒唑酮类化合物（二肽结构物质环化形成的副产物）1.3%。将上述氢化反 应液在40T下加一定萤的水，水解3h。水解反应结束后减压浓缩至甲醉浓度为 25%，冷却析晶，并冷冻至使结晶完全。40尤下真空干燥2d可得纯度近 100%的NTM,以起始原料计，NTM的回收率为73%。
三芳基膦和四氣化碳合用是转变伯醉和仲醇成为相应的有机卤化物的有效试 剂。四氣化碳与三苯基膦反应，反应认为有碳烯中间体生成。ph,p + ca4~~*? [PhjP*—ca,] cr
研究表明，乙酸稀溶液有利于6-PAS的生成，如2% ~ 10% (w/M；)。如图
图1 -27所示为浓度的增加对开始作用时间（~)、持久性时间和反 应的主观强度（S/)的总体影响情况。主观强度曲线上达到平衡稳定时间时，所即与离子载体激发历程（the ionophor triggering mechanism)或与受体的快速平衡 结合，假如以表示受体分子，尺.表示受体一底物复合物的离解常数，[SQ]为 非专一性结合区（假定是不变的）外口水中停留的糖分子浓度，[SJ为非专一 性结合区内口水中的糖分子浓度，r为被激活的离子载体的比例（例如为 [SR] / [Ra\),并假定r与品尝人员的主观反应（S/0 (例如甜味觉的主观强 度SI)有关。在味觉上升阶段，S/?可通过下式计算：
化合物[102]是由氨基丙二酸二酯经稳定化处理制得的，即用电子等排的 /V-甲基-酰胺取代不稳定的甲酯。但这样一来甜度损失很大，于是不得不考虑 改用其他简单的基团来模拟酯基团的重要结构特征，最后选择了一些通过叩2轨 道中心的平面型基团（如三个取代基的3-C原子均在一个平面上）。依据这种 选择制备的D, L-呋喃基甘氨酸（+) 葑基酯[103](表2-53)，这种 非对映体混合物的甜度要大大高于相应的/V-甲基-酰胺[102]。进一步研究 制得的苯基甘氨酸酯和其他杂环甘氨酸酯[104] ~ [106],它们的甜度也非常 大，特别是（-)或（+)-々-葑基酯化合物。苯基团和杂芳烃基团要 比通常的“上面”基团K,大，其中平面芳香烃基团在甜二肽结构上似乎起重要 的作用。例如，呋喃甘氨酸酯[103]经还原而得的四氢呋喃甘氨酸酯[107]， 其甜度大为下降。
二、奇异果素的甜味及变味特性
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶（GAP)基 因，其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh ￡co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段（-976? -1，推断+丨为翻译起始位点）作为启动子，用引物在V端加上N?d位点， 在3'端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段（+ 1006? + 1728)作为终止子，用引物在V端加上BamHI位点，在V端加上Pst丨位点， 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接，构建得质粒pGAPPTIO (图5 - 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral - Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建：从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2，在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl - Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点，构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切，并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后，与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl - KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后，与含CYH抗性 基因的丨.1比？311-5&丨1片段（-184?+974)连接，构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl - PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 - 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到，用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域（+4?+356)和 3'区域（+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段，这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll - Bgl H片段，从 PURA3的1端分离得BglD - Notl片段，两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI - Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间，构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl - PstI片段 插至pURALll的1^11和？8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。
每个参数前的系数表明，二肽化合物分子的甜度随分子疏水性和体积的增大而增 加，怛随分子垂直于轴距离的增大而减小。 .
