宁蒗县低聚木糖
基因植物表达Brazzein。随着生物技术的发展，现在研究人员可以用X射线衍 射、氨基酸测序和计算机分析等手段分析甜味蛋白的结构与构型，进行蛋白质全 新设计；也可以运用基W操作方法从植物中分离甜味蛋白的(:dna或运用遗传学 原理，根据氨基酸序列人工合成基因，再利用基因工程技术将Brazzein基W转人 微生物或者髙等植物中表达。
不同的有机溶剂，也会影响合成速率和平衡得韦。押论和实验都表明，乙酸 乙酯是最好的溶剂（表2 -7)。根据上述结论，我们分别用活塞流式反应器 (plug flow type, PFR)和连续搅拌釜式反应器（CSTR)进行试验，用固定在 Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶进行连续催化反应。首先将80mmol/L Z - Asp ^ 200mmol/L PheOMe溶解于饱和乙酸乙酯溶液，然后以外=1.5/h连续加人 PFR中，体系温度保持在40T。初始阶段反应得率>95%，反应进行80h后, 下降到30%左右（图2-26)。固定化酶发生了钝化，其主要原因是：在PFR 中，底物浓度在人口处最大，顺宥出口方向逐渐减小，人口处高浓度的Z-AsP 使嗜热菌蛋白酶的主要稳定因子Ca2<被螯合脱去，而且人口处固定化酶内部的 pH最低，使更容易被脱去。在底物中加入5mmol/LCa[ Z - Asp =80m?K)l/L, ct = 15。
1.棉子糖浓度对产物的影响
图3-16脱三笨卬基的反应式 注：三笨基氯甲烷极易水解为=笨基平醉、
最初分离出马槟榔I和II两种组分，Liu等人进一步分离纯化，发现它有5 种同工蛋白，分别为马槟榔I、1-1、n、10和IV,原来所指的马槟榔1包括 了马槟榔丨、丨-1、in和iv。其中马槟榔n的热稳定性最高，人们对它的研究 也最多，在80T至少可保持48h甜味不被破坏，而其他同系物在80*C保持0.5h, 甜味即丧失，因而马槟榔U具有较高的开发价值。马槟榔的热稳定性（及由此 决定的甜味特性）与其他甜蛋白有较大不同，与某个氨基酸组成有关。如有研 究认为不同马槟榔类似物热稳定性的差别是由于B链47位上是精氨酸（热稳定 型）还是谷氨酸（热不稳定型）。
直到最近，有关蔗糖甜味与其分子结构的关系问题人们仍未弄淸楚，通常认 为蔗糖的甜度与其分子中的某些羟基团有关。在过去10年内蔗糖化学的飞速发 展，使得人们冇办法专一地掩盖或取代某些羟基团来制备某些特定的衍生物，然 后通过味觉品尝以研究蔗糖的甜味与结构的关系。结果表明，蔗糖分子内葡萄糖 和果糖的某些特定羟基团参与了生甜团（glucophore)。而且发现，用疏水性的卤 素取代基来替代某些亲水性羟基，可大大提高蔗糖的甜度3
他们在对甜味和鲜味细胞、受体进行识别研究时，设计出了一种把受体活化 作用从细胞刺激中分离的方法。他们利用转基因鼠在T1R2-3表达细胞中表达 修饰/C-阿片受体，结果发现转基因鼠被阿片兴奋剂所吸引，这就证明了甜
图1 - 34 T1R2 - T1R3受体的结合部位注：两个钴合非蛋A质甜味剂的不同大小的活性位点，一个位于TMD的钴合甜蜜素的部位，另一个 位于站合蛋质的外部“横形”部位
分别用M. vuiacea、A reflexa、大肠杆菌和咖啡豆的《 -半乳糖苷酶催化棉子 糖和甜叶悬钩子苷的混合体系，产物情况见表4-27。半乳糖苷转化物的里随反 应时间增加而增加。大肠杆菌、咖啡豆和的《-半乳糖苷酶均产生 RGal-la, RGal-lb,但前二者的转化量小。
第三章庚精衍生钾
